【doc】丹参中隐丹参酮提取工艺的研究

【doc】丹参中隐丹参酮提取的研究 丹参中隐丹参酮提取工艺的研究 西北药学杂志2006年6月第21卷第3期 g,精密加入体积分数70%乙醇100mL,称定质量,加 热回流lh,放冷,称定质量,加入体积分数70%乙醇 补足减失质量,摇匀,过滤;弃去初滤液,收集续滤液 10mL,置50mL量瓶中,再加体积分数30%乙醇稀 释至刻度,摇匀;精密量取上述溶液2.5mL于25mL 量瓶中,再加体积分数30%乙醇10mL,然后再加入 50g?的NaNO2溶液0.3mL,摇匀,放置6min;加 入100g?的A1(NO3)30.3mg放置6min,再加入 1.0mol?L的NaOH溶液4mL,最后加入体积分数 30%乙醇稀释至刻度,摇匀,然后放置15min,于510 nm波长测定吸收度,结果见2. 表2木芙蓉叶含量测定结果(月=3) 3讨论 木芙蓉叶采收方法不同则导致其黄酮类含量不 同,虽然从上表看,烘干叶含量最高,但鲜叶含有水 份,从总的比较来说,应该是鲜叶直接入药.其次是 将鲜叶利用现在的技术低温烘干入药效果也很好,另 外应尽量避免脱落叶利用或变色叶利用,因其黄酮类 含量低,制剂的疗效也会受到影响. 参考文献: [1]江苏新医学院.中药大辞典[M].上海:上海科学技术 出版社,1977.371. [2]徐娅.木芙蓉叶的抗炎作用及其毒性研究[J].福建医 药杂志,1989,11(3):24.(收稿日期:20054)9-24) 丹参中隐丹参酮提取工艺的研究 徐燕,杨军仁,刘硕,罗定强,王军宪(西安交通大 学医学院药学系,陕西西安710061) 摘要:目的筛选丹参中隐丹参酮的最佳提取工艺. 方法以高效液相色谱法测量提取物中的隐丹参酮 含量作为指标,并用正交试验法优化提取工艺. 结果丹参中隐丹参酮的最佳提取工艺为A.Bc:, 醇,回流提取2 即用l0倍量体积分数95%工业乙 次.每次2h.结论优选出从丹参中提取隐丹参酮 的最佳工艺,为隐丹参酮的进一步研究提供参考. 关键词:丹参;隐丹参酮;提取工艺 中图分类号:R284文献标识码:A 文章编号:1004-2407(2006)03_()lll4)2 丹参为唇形科植物丹参SalviamiltiorrhizaBge. 的干燥根及根茎,性苦,微寒,归心,肝经,主要功能为 祛瘀止痛,活血通经,清心除烦,用于月经不调,经闭 通经,癜瘕积聚,胸腹刺痛,热痹疼痛,疮疡肿痛,心烦 不眠;肝脾肿大,心绞痛等的治疗?].随着对丹参研 究的逐步深入,以丹参为主药的各种制剂以其良好的 治疗效果和较高的安全性,在临床上被广泛应用. 目前,对于丹参提取物的脂溶性部分研究中,大 多数是以丹参酮?A作为质量控制的标准?或以丹 参酮I,二氢丹参酮I,丹参酮?A及隐丹参酮等多 种脂溶性成分作为含量测定的指标].现代研究表 明,丹参的脂溶性提取物中,以隐丹参酮的抗菌活性 ,毒性小,具有明显的药理活性与较高的临 强,含量高 床应用价值.笔者利用正交试验设计法优化提取 工艺,并采用高效液相色谱法测定隐丹参酮含量作为 检测指标,综合评价,确定了最佳的隐丹参酮提取工 艺,为隐丹参酮的进一步研究提供参考,也为丹参的 研究提供新的思路. 1仪器与试药 1.1仪器高效液相色谱系统,包括P2000泵;7725 型手动进样阀(美国Tsp公司);ANASTAR色谱工作 站(奥康科技有限公司);岛津UV100紫外检测器. SENCOR系列旋转蒸发器. 1.2试药隐丹参酮标准品购自中国药品生物制品 检定所;丹参药材购自陕西商洛,经鉴定为丹参的干 燥根茎;体积分数95%乙醇为工业乙醇;其他试剂均 为纯;高效液相用甲醇为色谱纯;蒸馏水自制. 2方法和结果 2.1色谱条件色谱柱为ODS柱(4.6mm×250 mm);流动相为甲醇一水(75:25);检测波长为270 nm;流速为lmL?min,;柱温为室温. 2.2标准曲线精密称取隐丹参酮标准品一定量, 置于量瓶中,用甲醇配成0.024g?L的标准溶液. 精密吸取标准溶液l,2,3,4和5mL分别置于10mL 量瓶中,用甲醇配制成0.0024,0.0048,0.0072, 0.0094和0.012g?L的梯度溶液.分别精密吸取 10进样,按上述色谱条件测定峰面积,以峰面积 对其所含的隐丹参酮质量回归,得回归方程Y=8.0 ×10.4.0×l0,r=0.9966,线性范围为0.024, 0.120g?. 2.3回收率试验取各样品溶液1mL,精密加入标 准品溶液1mL(0.O24g?),以lOL进样量每份 进样3次,以峰面积测定含量,得隐丹参酮的平均回 收率为98.60%,RSD为1.05%. 2.4重复性试验将正交分析中的l号样品的待测 溶液重复进样5次,每次l0L,测定峰面积,以峰面积 计算5次进样的相对标准偏差,结果RSD为1.68%. 2.5精密度试验将隐丹参酮的标准品溶液重复进 样5次,每次10,测定峰面积,以峰面积计算5次 进样的相对标准偏差,结果RSD为1+25%. 2.6提取工艺设计及试验结果 l12西北药学杂志2006年6月第2l卷第3期 2.6.1隐丹参酮的提取溶剂选择 2.6.1.1试验方法将丹参药材粉碎后,精密称定 0.5g3份,置于3个圆底烧瓶中,准确量取体积分数 95%-F_业乙醇,丙酮和苯各50mL分别加入圆底烧瓶 中,精密称定,水浴回流提取1h,放凉,再次精密称 定,并补充溶剂至回流前质量.过滤提取液,取续滤 液适量进样,按上述色谱条件测定峰面积(rt=3). 2.6.1.2试验结果根据峰面积,用外标一点法计算 隐丹参酮的含量,以体积分数95%工业乙醇提取物中 隐丹参酮含量最高,结合试验操作的简便可行与溶剂 使用的安全性,最终选择体积分数95%的工业乙醇作 为最佳提取溶剂. 2.6.2隐丹参酮提取工艺的正交试验 2.6.2.1因素水平表设计四因素三水平正交试 验,因素水平安排见表1. 衰1因素与水平设计表 水平丽丽专丽丽 l956l2 280822 3651032 2.6.2.2试验方法称取9份100g丹参粗粉置于 圆底烧瓶中,分别按上述正交设计进行提取,合并提 取液,回收溶剂至干,置于减压干燥箱中烘干至恒重, 称量.称取各份样品约0.1g,精密称定,置于5mL 量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,过滤,取续滤液适 量进样,按上述色谱条件测定峰面积. 2.6.2.3试验结果根据峰面积,用工作曲线法计 算隐丹参酮的含量,结果见表2,方差分析见表3. 衰2正交试验衰及结果 ABcD干 / 干酮 窖时厦爵/窖删H,耳l, 方差分析结果表明,A,B,c3个因素对试验结果 无显着性影响,即提取溶剂的浓度,加入溶剂倍数,提 取时间对于隐丹参酮的提取率的作用不明显.利用 正交试验设计法并未优选出最佳工艺.但在试验中 发现,醇浓度越低,提取物越难过滤,因此结合操作的 可行性,最终确定的最佳工艺为A,B,C,即用10倍 量体积分数95%工业乙醇,回流提取2次,每次2h. 3讨论 ?本试验以隐丹参酮含量作为评价指标,对从丹 参中提取隐丹参酮的提取工艺进行优化.通过正交 试验设计,A,B,c3个因素对试验结果无显着性影 响,但考虑试验操作的可行性及工业生产的效率等因 素,最终确定出相对较好的工艺. ?隐丹参酮为丹参脂溶性部分中含量较高的成 分,具有明显的药理活性,是一种具有开发应用前景, 临床实用价值,并能有效提取分离的化学成分.因 此,我们选用隐丹参酮作为评价指标,为其进一步的 开发利用和科学研究提供参考. 参考文献: [1]中国药典20O5年版[S].一部.2005.52—53. [2]陈蕾,朱霁虹.丹参中4种脂溶性成分的含量测定[J]. 中国药事,2004,18(12):749—751. [3]崔颖,薛明,史彦斌,等.反相高效液相色谱法测定隐丹参 酮的血浆浓度[J].中国兽医科技,1997,27(10):28,29. (收稿日期:2005-09.16I 庆大霉素致多种类型药疹1例 何世清(四川省甘孜州海螺沟景区人民医院,四川甘孜 626102) 中图分类号:R978.1文献标识码:A 文章编号:1004-2407(2006)03-0112-01 患男,23岁,以呕吐,腹泻3h到我院门诊治疗.前lEt晚 餐有进食不洁食物史.体温36.6C,大便常规脓细胞(+),查 体(一).10d前因上感肌注庆大霉紊8万单位,每日2次,连用 3d,初步诊断为急性胃肠炎.静脉滴注5Og?糖盐水.500 mL十庆大霉素24万单位(乐山三九长征制药厂,批号 20030530),10min后,患者述面部灼热瘙痒,逐渐蔓延至胸腹 部,皮肤出现较麻疹或猩红热更为鲜明的斑丘疹,对称分布,体 温38.9c,但无麻疹及猩红热的其他症状.立即停用庆大霉 紊,静脉滴注100g-L葡萄糖酸钙2omL,维生素c3g,地塞米 松15,马来酸氯苯那敏1O,肌肉注射,每日2次,皮损无 好转.1d后,皮损遍布全身,且在手背,脚背等部位出现数个 圆形或椭圆形水肿型紫红色斑块,边界清楚,并出现数个l5 cm大小的水疱,大疱,形状不规则,触痛明显,尼科耳斯基征阳 性.局部外擦复方炉甘石洗剂.4d后皮损开始消退.颜色变淡, 脱屑,手背脚背皮损处遗留色素沉着,2周后大庖形皮损恢复. 庆大霉素致过敏反应临床偶有报道,但同时致固定性药 疹,猩红热样药疹,大疱表皮松解型药疹临床报道少见.本病 例提示我们在临床工作中要警惕庆大霉素致多种药疹的发生. (收稿日期:2005-10-09)