42例晚期肺腺癌患者外周血游离DNA的EGFR基因突变检测指导靶向治疗的临床观察

42例晚期肺腺癌患者外周血游离DNA的EGFR基因突变检测指导靶向治疗的临床观察 42例晚期肺腺癌患者外周血游离DNA的EGFR基因突变检测指导靶向治疗的临床 观察 [3】黄沛隆.血清C肽和胰岛素测定对2型糖尿病的诊断价值【J】.中国基层医药, 2006,13(4):667. [4】吴翔,邱学勋,王宏化.2型糖尿病患者C一肽含量的测定的临床意义[J]_中国 热带医学,2010,10(10):1242. [5玮,赵枰,陶国华.化学发光免疫分析测定胰岛素及C肽在2型糖屎病诊断 中的临床应用叨.标记免疫分析与临床,2009,16(5):283. 编辑,杜苏利 42例晚期肺腺癌患者外周血游离DNA的EGFR基因突变检测指导靶 向治疗的临床观察 陈群,谢强,石琴,肖松,李育宏,林江平,王成辉,陈巧林,黄新辉,王琳 (福建医科大学附属福州肺科医院肿瘤内科,福建福州350008) 摘要:目的通过对42例晚期肺腺癌患者血清循环DNA的EGFR基因突变检测,筛选EGFR突变型患者并评估靶向性药物酪氨酸激酶抑制 剂(TKIs)对其的临床疗效.方法从42例肺腺癌患者血清中提取DNA,使用突变富集一液相芯片联用法检测.结果42例肺腺癌患者血清 DNA中,EGFP,.突变率为47.6%(20/42),其中外显子19缺失和21突变分别占26.2%(11/42例),35.7%(15/42例),EGFP.基因突变于女性患者 55.0%.对2O倒EGFIL基因突变NSCLC患者进行TKIs靶向治疗,客观有效率(ORa1)为60.O%,病情控制率(Dck)为85.O%;疾病进展时间 (TTP)72~637天,中位TTP172.5天.另有22例EGFR野生型NSCLC患者全部服用特罗凯,ILK为13.6%,DCR为36.4%;TTP36-221天,中 位TTP108天.组间ORR,DCR,中住TTP比较,差异存在统计学意义.结论部分晚期肺腺癌患者肿瘤组织难以获得,外周血中游离DNA 的EGFP.突变检测便成为一种选择.本研究提示以外周血中游离DNA的EGFK突 变检测结果为依据选择TKIs药物治疗,对晚期肺腺癌惠者 具有一定指导意义. 关键词:肺腺癌;血清;表皮生长因子受体(EGFR.);酪氨酸激酶抑制剂(TKIs);个体化 治疗 GllidetheTargetedTherapybyEGFRMutationsDetectionofFreeDNAinPeripheralBloodfrom42 PatientswiththeAdvancedLungAadeno-carcinoma CHENQun,X皿Qiang,SHIQin,etal (DepartmentofOncology,theAffiliatedFuzhouPulmonaryHospitalofFujianMedicalUniversity,Fuzhou350008,China) Abstract:ObjectivescreenedEGFRmutationandevMuatedtheeffectsofepidermalgrowthfactorreceptortyrosinekinaseinhibitorsGFR—TKi)by EGFRmutationdetectionoffreeDNAinperipheralbloodfrom42patientswithadvancedlungadenocarcinoma.MethodToextracttheserumfree DNAinperipheralfrom42patientswithadvancedlungadenocarcinoma.Tousethejointdetectionbythetechnologyofmutant-enrichedPCRand luminex.ResultTheEGFRmutationrateoffreeDNAinperipheralbloodfromthe42patientswithadvancedlungadenocarcinomawas47.6%(20, 42).Amongthe42patients.exon19/21mutationratewere26.2%(1l~2)and35.7%(15/42)severally.ThemutationrateofEGFRgeneforfemale was55.O%.ToselecttargetingtherapyofTKiagainsttheadvancedlungadenoeareinomafor20patientswithEGFRmutations.Theobjective respondrate(0RR)was60.O%,thediseasecontrolrate(DCR)was85.O%,timetoprogresscrrp)was72-637days,themedianr仰was172.5 days.22caseswild-typeofNSCLCtakeeretinib150mgqd.TheORRwas13.6%,theDCRwas36.4%,1]was36-221days,themedianrrP was108days.ThegroupdifferencesweresignificantatORR,DCRandmTYP.ConclusionItishardtoacquirethetumortissuesofpatientwith advancedadenocarcinoma,soEGFRmutationsdetectionoffreeDNAinperipheralbloodha dbecomeanoption.Itisimportancevaluetoselect targetingtherapyofTKi~#nsttheadvancedlungadenocarcinomaonthebasisofEGFRgene mutationdetectionoffreeDNAinperipheralblood. Keyword:edenocarcinoma;sertlm;epidermalgrowthfactorreceptor(EGFR);tyrosinekina seinhibitors(TKi);individualizedtherapy 在晚期NSCLC的一线含铂两药的化疗疗效已到达瓶颈.因此在 临床上需要一些新的治疗策略来改善患者的生存.大量的临床研究 证实,小分子TKIs药物(吉非替尼或厄洛替尼)对EGFR突变非小细 胞肺癌(NSCLC)患者疗效较好.本研究对42例肺腺癌患者外周血游 离DNA的EGFR基因突变与选择性靶向治疗进行临床观察,报道如 下: 1材料与方法 1.1病例资料自2008年lO月一2010年6月,在本院收治的Illb一 ?期肺腺癌患者42例,其中男性17例,女性25例,年龄3O,83岁,< 4o岁者2例,4o一49岁者10例,5O一59岁者10例,6o一69岁13例, ?70岁者7例,平均年龄(59-3~10.7)岁,中位年龄62岁.组织类 型全为肺腺癌,所有患者均在知情同意后采集血样. 1.2EGFR基因检测经前臂静脉采集外周血液约5mL,4?放置过 夜后离心分离血清.血清游离DNA提取后检测,检测内容:EGFR基 收稿日期:201l—o6—20 ? 因的外显子19(E19)和外显子21(E21);检测方法:突变富集一液相 芯片联用法;主要材料:surplexTM肿瘤靶向治疗靶标检测液相芯片 (系列);主要设备:液相芯片阅读仪;检测单位:广州益善生物技术有 限公司. l-3表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR—TKi)的治疗治疗 是口服吉非替尼250mg/d或厄罗替尼150mg/d,直至病情进展. 治疗开始后前3个月每月评估疗效,随后每2个月评估1次.疗效评 判标准依据实体肿瘤疗效评估指南. 1.4统计学方法统计学处理采用SPSS13.0软件进行方差分析,以 P<O.O5为差异有统计学意义. 2结果 2.142例肺腺癌患者外周血游离DNA的EGFR基因突变和临床情 况见表1,总体EGFR基因检测结果:突变率47.6%(2~42例),El9 缺失28.1%(11/42例),E21突变35.7%(15/42例).42例中有11例 长期大量吸烟(>400年支),突变型患者中仅3例,野生型有8例. 医学信息2011年8月第24卷第8期MedicalInformation.Aug.2011.Vo1.24.No.8 表142例肺腺癌患者外周血游离DNA的EGFI:I基因突变和临床 情况 标号条形码或检测号性别年龄是否吸烟疗效判断I11P检测结果 (M)El9E21 2.220例EGFR基因突变者,女性患者11例,占55.O%,服用TKIs 疗效RR60.0%(12120),DCR85.0%(17/20),1.rP72,637天,中位rrI'P 172.5天;22例野生型服用特罗凯疗效RR13.6%(3/22例),DCR 36.4%(8/22例1,,ITP36~221天,中位,rrP108天.组间ORR,DCR, 中位P比较,差异存在统计学意义.见表2. 袭232例肺腺癌患者外周血游离DNA的EGFR基因突变型和野 生型}较 3讨论 在晚期NSCLC的一线化疗后的总生存期(OS)是7.4,10.3个 月,1年生存率为26%,43%,近年来疗效没有得到进一步的提高,因 此在临床上需要一些新的治疗策略来改善患者的生存.表皮生长因 子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR—TKIs)的应用,为肺癌的治疗带来 了新的希望.大量的临床研究证实,小分子TKIs药物(吉非替尼或厄 洛替尼)对EGFR突变患者疗效较好.EGFR突变主要指l9外显子 的缺失和21外显子的点突变,占EGFR突变的绝大多数.IPASS研 究,厄洛替尼西班牙SLCG研究,SATURN研究结果显示,EGFR突变 的NSCLC患者在生存和缓解率获益令人印象深刻,毋庸置疑,EGFR 突变是EGFR—TKIs个体化治疗的第一个明确靶点,也是NSCLC治 疗的新里程碑. 但如何获取更准确,更简单易行的检测手段,一直是探讨的热 点,近年国内外开始尝试血清循环DNA检测EGFR基因突变.业已 证明,实体肿瘤(包括肺癌)患者的血循环中存在游离的肿瘤DNA,其 来源主要是肿瘤组织中癌细胞凋亡后.癌细胞内的DNA释放人人体 外周血,经癌组织来源的循环DNA中基因变异与循环血中DNA相 一 致,且肿瘤患者外周血游离DNA含量比正常健康人增高10倍[1-2]. EGFR基因突变是肿瘤特异性的体细胞遗传改变,这类突变基因仅 存在于癌细胞中,体内所有正常细胞均属于野生型.因而通过检测 血清游离DNA的EGFR基因,可以筛选到这类肿瘤特异性的药效评 估标志,从而为临床用药提供依据.最近.Kimura等曾对27例mb, ?期非小细胞肺癌患者进行了血清EGFR检测,共检出突变13例( 48.1%),吉非替尼的客观有效率为53.8%(7113例),病情控制率为 84.6%(11/13例),中位无进展生存时间为200d,中位生存时间为 611d.而对EGFR野生型肺癌,吉非替尼的客观有效率为14.3%( 2114例),病情控制率为42.9%(6/14例),中位无进展生存时间为 46d,中位生存时间仅为232d,2组间差异极为显着(P<0.01). 本研究专门选择肺腺癌患者42例,血样中检出EGFR突变20 例,突变率为50.O%,16例EGFR基因突变者进行TKIs靶向治疗,客 观有效率为60.0%,疾病控制率为85.O%;1.?,72637天,中位,I'I'P 172.5天.22例野生型TKIs治疗RR13.6%,DCR36.4%:rrP36, 221天,中位T?,108天.突变型与野生型在客观疗效和疾病控制和 中位1TrP方面比较,差异有统计学意义.提示:依据外周血游离DNA 中EGFR基因突变检测结果进行选择性靶向治疗,可以为部分肺腺 癌患者提供了指导作用,尤其对于不耐受化疗兼无法获取组织学检 测的腺癌患者,或多程放化疗后尚未使用TKi的肺腺癌病人.尽管尚 存在一些需要解决的问题,但是由于晚期肺腺癌的组织难于获取,故 外周血游离DNA中EGFR基因突变检测仍不失是一种临床治疗中 可资参考的补充手段.而且血样采集方便,患者易于接受,该项技术 值得临床应用. 参考文献: 【1]张华,张国玲,许凯黎,等.卵巢癌血清3号染色体短臂基因杂合性丢失的研 医学信息2011年8月第24卷第8期MedicalInformation.Aug.2011.Vo1.24.No.8 究【J】.中华妇产科杂志,2002,37(5):298—300. 【2]BREMNESRM,SIRERAR,CAMPSC.CirculatingtumorderivedDNAand RNAmarkersinblood:atoolforearlydetection,diagnostics,andfollowup叨. LungCancer,2005,49(1):1—12. [3】董强刚,黄进肃,黄建,等.肺癌靶向治疗研究进展和我国肺癌的EGFR基因 突变概况叫.肿瘤,2005,25(6):625—634. 【4]KIMURAH,KASAHARAK,KAWAISHIM,eta1.Detectionofepidermal growthfactorreceptormutationsinselqlmasapredictoroftheresponsetogefi— tinibinpatientswithnon-small—celllungcancer[J】.ClinCancerRes,2006,12 (13):3915-3921. 编辑/杜苏利 高自细胞急性自血病患者血清slCAM-1表达研究 吴秀兰,李学亮 (临沂市人民医院,山东临沂276003) 摘要:目的探讨slCAM-1在高白细胞急性白血病(HI^I)患者中的表达及临床意义.方法采用ELISA法检测3O例HLAL患者及20例非 H患者血清slCAM一1的表达水平,同时选择20例健康查体者作为对照组.结果治疗前后HLAL和非HLAL患者血清slCAM-1水平显 着高于对照组,HLAL组患者血清slCAM一1水平高于非HL虬组患者.结论slCAM-1在HLAL患者中的异常表达可能在HLAL的发生,发 展中发挥了重要作用. 关键词:白血病;高白细胞;急性;ELISA;可溶性细胞间粘附分子-1;slCAM一1 ExpressionofsICAM-1inPatientswithHyperleukocyticAcuteLeukemiaandItsClinicalSi gnificance WUXiu-lan.LIXue—liang (LinyiCityPeopleSHospitalofShandongProvince,Linyi276003,China) Abstract:ToinvestigatetheexpressionlevelsofserumsICAM-1andtheirclinicalsignificane esinpatientswithhyperleukocyticacuteleukemia (HIJAL).TheseFumlevelsofsICAM-1in30hyperleukocyticacuteleukemiaand20non-hy perleukocyticacuteleukemiaweredetectedbyELISA. comparedwith20healthypersonsasthecontrolgroup.TheexpressionofslCAM一 1inpatientswithhyperleukocyticacuteleukemiaandnon— hyperleukocyticacuteleukemiaweresignificandyhiSherthanthoseincontrolgroup,expeei allyinhyperleukoeyticacuteleukemia.Overexpressionof slCAM-1mayplayakeyroleinthegenesisandprogressionofhyperleukocyticacuteleukemi a. Keywords;Acute;ELISA;sICAM-1 高自细胞急性白血病(hyperleukocyticacuteleukemia,HLAL)是 指外周白细胞超过100xl09/L的急性白血病,其病情重,并发症多, 易发生急性肿瘤溶解综合症,病死率高,早期死亡率23.8%一60.0%. 我们通过ELISA法检测30例HLAL患者血清可溶性细胞间粘附分 子一1(slCAM一1)的表达水平,探讨其表达特点及与临床疗效之间的 关系,现报告如下. 1临床资料 1.1研究对象 1.1.1病例来源选择2003年5月,2008年1O月住院治疗的HLAL 患者3O例,男19例,女11例;年龄l5,63岁,中位年龄4l岁;其中 急性淋巴细胞白血病(ALL)10例,急性非淋巴细胞白血病(ANLL)20 例.选择同期住院的非HLAL患者20例,男12例,女8例;年龄2O, 54岁,中位年龄39岁;其中ALL1O例,ANLLlO例,均符合诊断标 准.对照组为我院健康查体者20例,男12例,女8例;年龄25,54 岁,中位年龄35岁;均无血液系统,肝肾及感染性疾病. 1.1.2化疗方案及疗效判断HLAL患者初选用羟基脲或VP(长春新 碱,泼尼松)方案,待外周血白细胞低于40xl&/L后选用以下方案: ALL患者选用VDC(L)P(长春新碱,柔红霉素,环磷酰胺或左旋门冬 酰胺酶,泼尼松)方案或Vwc(L)P(长春新碱,米托蒽醌,环磷酰胺 或左旋门冬酰胺酶,泼尼松)方案,ANLL患者选用DA(柔红霉素,阿 糖胞苷)方案,HA(高三尖杉酯碱,阿糖胞苷)方案或MA(米托蒽醌, 阿糖胞苷)方案,急性早幼粒细胞白血病患者选用三氧化二砷或三 氧化二砷加DA或HA方案.疗效标准参照张之南主编的《血液学诊 断及疗效标准》?. 1.2标本采集及检测 收稿日期:2011-06—20 垂 1.2.1标本采集所有检测对象均于清晨空腹抽取枸橼酸钠抗凝外周 血2ml,1500r/min离心10min,取血清,一20?冰箱冻存待测. 1.2.2sICAM一1检测采用双抗体夹心ELTSA法检测,试剂盒购于深 圳晶美生物技术有限公司,按说明书操作. 1_3统计学分析数据采用X一:t:S表示,采用SPSS11.0统计软件处理, 组间比较采用x检验,以P<O.05为差异有统计学意义. 2结果 2.1化疗效果3O例HLAL患者中缓解(完全缓解CR+部分缓解PR) 2O例,未缓解6例,死亡及放弃治疗4例.2O例非HLAL患者缓解 (CR+PR)16例,未缓解(NR)4例. 2.2化疗前sICAM一1检测结果化疗前HLAL和非HLAL患者血清 sICAM一1水平显着高于对照组(P<O.01),且HLAL组患者血清 sICAM—I水平高于非HLAL组患者,差异有统计学意义(P<0.01). HLAL组,非HLAL组及对照组sICAM一1检测结果见表l. 表1白血病患者化疗前slCAM一1水平(X+S) 注:"与对照组比较,P<0.0l. 2.3治疗前后白血病患者sICAM一1水平的变化所有患者治疗前后 缓解组slCAM一1水平较化疗前显着下降(P<0.01),未获缓解患者治