甘露散治疗更年期潮热证的实验研究

甘露散治疗更年期潮热证的实验研究 塞旦堑与ll占床2006第9卷第1期PracticalPhann蝌AndCliniRernedies.2006.Vo1.9.No 配现用并测定含量. 参考文献: [1]浙江省卫生厅.浙江省医院制剂规范[M].杭州;浙江科学技 术出版社,1988.129.130. ? 17? [2]过氧乙酸的古量测定.GB/T.19108.2003. [3]奚念朱.顾学裘主编.药荆学[M].第2版.北京:人民卫生出 版社.1990.450.455. 【4]郑明新,高绪文.医院感染【M】.北京:人民卫生出版社. 1997.82.84. 甘露散治疗更年期潮热证的实验研究 檀德宏,韩俊艳,关鹏,王敏伟 (1.沈阳药科大学,沈阳110013;2.沈阳大学.沈阳110035;3.辽宁大学,沈阳110036) [摘要]目的研究甘露散(GanLuSan,简称GLS)对更年期潮热证的影响.1.小鼠静注氮茶 碱造 成潮热模型.灌胃GLS治疗.测定给药后耳廓微循环微动脉血流速度及微动脉与微静脉口 径.2.大鼠口服党参 与黄芪煎剂造成热证模型.灌胃GLS治疗,测定给药后体温与ATP酶活性.结果GLS可减轻 小鼠潮热模型潮 热症状,使循环微动脉血流速度降低,微动脉与微静脉口径缩小;对热证模型大鼠.GLS可以 降低体温.减少ATP 酶活性.结论GLS对试验性更年期潮热证具有治疗作用. [关键词]甘露散;更年期综合征;潮热;茶碱;ATP酶活性 ExperimentalstudyofGanLuSanonrednessofclimactericsyndromeTANDe—hong,HANJun—yan. GUANPeng,et a1.(ShenyangPharmaceuticalUniversity,Shenyang110013,China;ShenyangUniversity.Shenyang1 10035.China; LiaoningUniversity,Shenyang110036,China) 【Abstract】 ObjectiveToinvestigatetheeffectofGanLuSan(GLS)Onrednessofclimactericsyndrome.Meth. otis1.Rednessmodelmiceweremadebyaminophyllineiv.andweretreatedbyGLSpo.velocityofpreca pillaryarteri— oleanddiameterofbothprecapillaryarterioleandpostcapillaryvenuleonearweremeasuredaftertreatm ent.2.Pyretic modelratsweremadebybrothofrhubarbandCodonopsispilosula,andweretreatedbyGLSpo,bodytem peratureand activityofATPenzymeweremeasuredaftertreatment.ResultsGLScoulddecreasevelocityofprecapill aryarterinle andshrinkprecapillaryarterioleandpostcapillaryvenuleonearinrednessmodel,anddecreasebodytem peratureandac tivityofATPenzymeinpyretiemodel_ConclusionGLSiseffectiveinthetreatmentofrednessofclimact ericsvn— drome. Keywords:GanLuSan;CIimactericsyndrome;Redness;Aminophylline;ATPenzyme 中图分类号:R285.5;R588文献标识码:A文章编号:1673—0070(2005)05—0017—03 甘露散方源自<圣济总录>,由黄连一两,吴茱 萸半两组成,主治热证暑气为病…1.潮热为围绝经 期和绝经期最常见症状,是更年期妇女寻求雌激素 替代疗法(ERT)的最常见的原因.本文通过GIS 对茶碱致小鼠潮红模型微循环的影响,对热证模型 大鼠体温与ATP酶活性的影响,探讨GI.S对更年 期潮热证的作用. 1材料 1.1实验药物,试剂黄芪,党参,黄连,吴茱萸等 生药购于沈阳东北大药房.黄芪与党参按照1:1 剂量配好,加水煎煮2次,在恒温水浴中浓缩为相 当于2g/ml生药的药液,无菌封装保存.黄连与 吴茱萸按照2:1的比例配好,加水煎煮2次,混合 煎液在恒温水浴中浓缩为相当于2g/ml生药的药 液,无菌封装保存.垂体后叶素:规格3u:0.5ml. 上海禾丰制药有限公司.茶碱:规格2ml:0.5g. 宜昌民康药业有限公司.Na.K.ATP与ca2+. 收稿日期:2005一O5一O8 作者简介:檀德宏(1968一)男,工程师,硕士学位,主要从事新 药的药理毒理研究工作. Mg一ATP酶测试试剂盒购自南京建成生物公司. 1.2动物雌性昆明种小鼠,体重18,22g.雌 性SD大鼠,体重200--220g.动物均购自沈阳医 学院实验动物中心.合格证号:辽实动质字2000 [022号]. 1.3仪器WX一753型微循环显微镜,WIS—II型 血流测速仪均由徐州医用光学仪器厂生产;721型 分光光度计:上海安亭科学仪器厂出品. 2方法 2.1GLS对茶碱致小鼠潮热模型微循环的影响 参照文献方法J,取雌性小鼠60只,随机分成6 组,第1组为正常对照,第2组为模型对照,3,4,5 组为GLS给药低(GISI),中(GLSM),高(GLSH) 剂量组,给药剂量分别为10,20,40g/kg,给药体积 为0.2ml/10g.1,2组给予等剂量蒸馏水.3,4,5 组每天灌胃给药1次,连续7d;第6组为阳性药物 垂体后叶素(pituitrin)组,仅在其他组最后一次给 药日,ip给药,剂量为005u/只.末次给药后1h (第6组ip后20min).静脉给予氨茶碱注射液,用 2%戊巴比妥钠40mg/kg,ip麻醉,将小鼠耳廓放 ? 18-实用药物与I临床2006年第9卷第1期PracticalPharmacyAndClinicalRem趟i2QQ,v1)1.2i! 垒j 在微循环显微镜载物台上,观察测定耳廓三级动脉 毛细血管()和三级静脉毛细血管(V3)的直径, 用血流测速仪测定A血流速度. 2.2GIS对热证模型大鼠体温及ATP酶活性的 影响参照文献方法【引,分组:正常雌性sD大鼠, 体重180,220g,随机分5组,每组l0只,分别为 正常对照组,热证模型组,GIS治疗低剂量组,中 剂量组,高剂量组,每组均分2个鼠笼饲养.造模: 造模方法参见文献,除正常对照组外,各组鼠每天 以党参与黄芪1:1的水煎浓缩液(1g/m1)4ml灌 胃14d,造成潮热证模型.正常对照组每日给等体 积蒸馏水.治疗前体温测定:第14日,造模给药后 1h测定体温,作为治疗前体温.测温方法:在安 静,室温22?.时间为早上9,10点,按照给药顺 序依次测定,从肛门插入用液体石蜡润滑过的数字 温度计(中2mm),进入直肠深2.5cm,测定直肠温 度.给药治疗:自第15日开始进行给药治疗,给药 组每天以GLS浓缩液灌胃,低,中,高各组剂量分 别为5,10,20g/kg,给药体积为1ml/100g,正常 对照组与模型组给等体积蒸馏水,共3d.治疗后 体温测定:最后一次给药后1h测定体温,作为治疗 后体温.计算治疗前后差值. 采血测定Na,K一ATP与~Ca2一Mg2+一ATP 酶活性:上述动物在体温测定结束后,从眼眶取血 1ml,按试剂盒(由南京建成生物公司提供)说明书 进行酶促反应,定磷等,用721分光光度计在660 nm处测定各管吸光度,以每小时每10’个红细胞 的ATP酶分解ATP产生1mol无机磷的量为1 个ATP酶活性单位. 2.3数据处理采用t检验处理实验结果. 3结果 3.1GLS对氨茶碱致小鼠潮热模型微循环的影 响实验结果见表1,表2,给氨茶碱小鼠耳廓表现 出潮热症状,显微测定结果.微动脉,微静脉血管较 正常对照组比较,均显着扩张,微动脉血流速度加 快.给予GLS各组潮热症状减轻,微动脉血流速 度较模型组减缓,其中的中,高剂量组与模型组比 较,差异显着(P<0.05).微动,静脉血管径缩小, 高剂量组动,静脉管径缩小均有显着意义(P< 0.05).本实验表明,GLS对由氨茶碱致潮红模型 有效.阳性药物垂体后叶素可以使微动,静脉管径 均有缩小(与模型组比较),具有显着性差异;使微 动脉血流速度下降,差异显着,但幅度低于GIS高 剂量组. 3.2GIS对热证模型大鼠体温及ATP酶活性的 影响结果见表3,表4. 表1GLS对小鼠潮热模型微动脉血流 速度的影响(;?s.,l=10) 与模型组比较,*P<0.05 表2GLS对小鼠潮热模型微动脉, 微静脉口径的影响(x?s,n=10) 与横型组比较,*P<0.05 表3GLS对热证模型大鼠体温的影响(x?s) 与模型组比较.*P<0.05,**P<0.01 表4GLS对热证模型大鼠Na.K.ATP和 Ca2.Mg2.ATP活性的影响 {p,molPi/10’RBC.h)(?s) 与模型组比较.*P<0.05,**P<0.01 由表3可见,热证模型组在造模给药14d后 及治疗给药后,体温均明显高于正常对照组,模型 成立.GIs给药各组治疗前体温相似.治疗后备 组体温均下降,与模型组比较,高,中剂量组均具有 显着性差异(中剂量组P<0.05,高剂量组P< 0.01).高剂量组体温下降达到正常对照组水平. 本实验表明,GLS对热证模型具有明确的降低体 温作用. 由表4可见,热证模型各组的Na.KATP 酶活性比正常对照组显着升高.GIS治疗各组 NaKATP酶活性均下降,有明显的量一效关系, 高,中剂量组分别与模型组差异显着(P<0.01,P 实用药物与临床2006年第9卷第1期 PracticalPharmacyAndClinicalRemedies.2006.Vo1.9,No.1?19? <0.05),高剂量组降低至与正常对照组无差别的 水平(P>0.05). 热证模型组的Ca2一Mg2+一ATP酶活性也显 着升高,与其相比,GLS各组该酶活性显着下降, 其中的高剂量组与中剂量组与模型组比较差异显 着(P<0.05),高剂量组降低至比正常对照组还要 低的水平. 4讨论 更年期是妇女从中年到老年的过渡时期,目 前,国际上公认的更年期从41岁开始,可长达20 年之久.更年期综合征(ClimactericSyndrome, CS)是指妇女在绝经前后,由于雌激素水平波动或 下降所致的以植物神经系统功能紊乱为主,伴有精 神心理障碍的一系列症状.它涉及内分泌,生殖系 统,精神神经系统,心血管系统,骨代谢,脂代谢等 多个方面. 潮热为围绝经期和绝经期最常见症状,也是患 者寻求雌激素替代疗法(ERT)最常见的原因.潮 热症状典型表现为面部和颈部皮肤阵阵发红,常波 及全身,但以头,颈,上胸和背部明显.伴有潮热, 焦虑,心悸.继之出汗.潮热发作后患者常感觉发 冷,有时伴有寒战,持续时间30S至5min不等.有 时长达10min.此种血管功能不稳定可历时1年, 有时长达5年或更长.中医认为,更年期综合征主 要是由肾虚所致.肾阴虚则虚火妄炎,造成了潮热 症状. 甘露散方中黄连味苦,寒,归心,脾,胃,肝,胆, 大肠经,具有清热燥湿,泻火解毒的功效;吴茱萸性 味辛,苦,热.有小毒.归肝,脾,胃,肾经,具有散寒 止痛,降逆止呕,助阳止泻的功效.黄连和吴茱萸 是寒热相配的一种药对,两者相互制衡,甘露散中 黄连与吴茱萸用药之比为2:1,总体药性偏寒,又 不过寒,主治热证暑气为病….虽然潮热也是一种 热证,但未见有甘露散用于更年期潮热证的报道, 可能与人们对更年期综合征是否需要治疗的认识 有关. 近年来的研究发现,黄连除具有良好的抗菌作 用外,还具有改善精神神经疾病作用,对抑郁,焦 虑,失眠等均具有显着的效果[4;吴茱萸具有良好 的减肥,降血脂及抗衰老作用[引,上述症状均与更 年期综合征有关,预计黄连与吴茱萸的组合将更多 地用于更年期综合征的f台疗. 本实验以氨茶碱注射液复制了潮热的动物模 型.给予GIs后,各组大鼠动脉血流速度较模型组 减缓,微动,静脉血管径缩小,外观潮热表现明显减 轻,表现出了良好的治疗潮热作用. 以黄芪与党参灌胃大鼠复制热证模型,动物表 现为体温升高,ATP酶活性升高,经GLS治疗后, 体温下降.ATP酶活性降低,表现出GLS降低体 温与降低产热的作用. GIS对以上两个与潮热相关的模型有效,相 关机理有待进一步探究. 参考文献: [1]李盛青.黄兆胜.黄连与吴茱萸不同比例组成的方剂的不同 药理作用研究[J].广州中医药大学学报.2002,19(1):4851. [2]胁田广美.黄连解毒汤及其组成生药对心血管系统的作用t 对颜面发热,潮红的效果[J].JTradMed,2002,19(6):230. 237. [3]陈群,徐志伟,刘亚梅.等.大鼠红细胞膜钠泵活性与造模实 热证,虚热证的关系[J].中国中医基础医学杂志,2000,6(2): 34. [4]朱静石,任兵,刘斌.黄连的药理学研究进展[J].北京中医药 大学学报.2001.24(6):51.53. [5]PearceLV.PctukhovPA,SzaboT.Evodiaminefunctionsasan agonistforthevanilloidreceptorTRPVI[J].OrgBiomolChem, 2004.21(16):2281.2286. 美洛昔康贴片抗炎作用实验研究 王彩霞.,张宏武.,王荣端..刘玉兰 (1.石药集团中奇制药技术(石家庄)有限公司,石家庄050051;2.沈阳药科大学药学院,沈阳110016) [摘要]目的观察局部用美洛昔康贴剂(MelT)的抗炎作用及其对胃肠道的刺激性.方法采用二甲 苯致幔腔毛细血管通透性增加法和二甲苯致耳肿胀法,角叉菜胶诱发足肿胀法以及完全佐剂诱导佐剂性关节炎 等实验方法.结果MelT局部粘贴小鼠2O,10,5mg/kg.明显抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀和二甲苯引起的皮 肤毛细血管通透性的增加,大鼠足部粘贴14,7,3,5mg/kg,明显抑制角叉菜腔致大鼠足肿胀;对AA大鼠原发性 和继发性炎症均有抑制作用,且大鼠胃肠道粘膜出血和溃疡比Mel灌胃组少.结论MelT有明显的抗炎作用, 不茛反应小于口服给药. [关键词]美洛昔康贴剂;抗炎 收稿日期:2005—08—12 作者简介:王彩霞(1971一),女,内蒙人,硕士学位,工程师.