[doc] ^51Cr标记法测定红细胞寿命的应用现状

[doc] ^51Cr标记法测定红细胞寿命的应用现状 3Cr标记法测定红细胞寿命的应用现状 I咄J989l22(„)l2J5 [BFuH-时.c矗c}lMg吐晰_瞄I耵cIiIl?tory sl9B6?p3O7 [9)Kh椰D.n.enymel989I4l(3)FJ21 [10)N0gudliT.a1.JB(1~emi986l265ll3807 :【】丁N0|?iT.n.jB哪l987I262Il?3硒 [12]Miwas.n. JHe删dJ985lJ9l29t [13)1瞎awas,et直1.AmJHcmat~ll98?Fl6l53 (1)T吐e即啪s.n.m?d198?{l754 ?223? 文献 [15]MjvaS.n.口rJmaId1979I?3l275 【J6]【.-k鳓硪M.et.AmJH锄 ml999-31(?)l225 [17]MkiT,吼.H奉血攘学台志l988,5L(6) loB0 【J8]z明e【IaA.亡t.BrJH?m-恤Il988I69(3)-399 [19kstas.d.BrJH呻Idl9盯?67(1t485 [20)B即llerE.etAmJMJ987I85(5),899 [2述山东省立医院内抖孔宪云守拉 1919年. II竹建立丁定扛细胞(R母c)寿命 的鉴别凝集法.从而使』,们对R烈:动力学有了较多 的了解.但莰法操作繁杂.难以在临床推广.J950 年,G加y和Sterl~g报告了用cr标记(cr—R烈:)测 定R?:寿命的方法,该法不仅操作简便.而且能同 时测定R麒:破坏郭位和血容量.对溶血性贫血(HA) 和其他一些疾病的诊断具有重要意义,因而引起人 们极大的兴趣,相继开展了有关方法学及其临床应 用的广泛研究.国际血液学标准化委员会(tCSH)于 1980年召开专会议.统一了用Cr-RBC溯定R麒: 寿命的方法学及指标的正常值,促进其在临床上的 推广应用”]. 一 ,常用指标和正常值 0标记法测定R麒:寿命的常用指标有RBC 观半寿期(erytllr~yt~a~tenthalf?limesurvival+ RBC-T)和RBC平均寿命(嗍cellli向J】, McL).前音正常值为28天.后者为1204-J5天:. 0半衰期27.7天.适于R麒:寿命检查.0 标记法属随机标记法.D缺乏症和各胱甘肽合成酶缺乏症.R麒:寿 命得以改善.Ben~amtn报告用甘油醛(g】y.erayde) 治疗镰状细胞贫血.延长了RBC寿命D].R且c寿命 改善与否是评价治疗NA新药的可靠的客观指标. NA病人的脾切棘手术效果同佯可用R卫c鼍命 改善与否加以评价.Ahu根据肝肆区体表计啦有关 指标脾切除手术指征.选择了J8倒符合指征的 HA病人.术前测定ItBC寿命均明显缩短,术后复 查.结果显着延长.根据体表计数决定手术指征 是可信的. (三)溶血机制的研究 R烈:寿命测定不仅在HA的诊断和治疗上具有 实用价值.而且还可用来探讨溶血机制.M~gnanl用 “0一RBc研究十体年龄对R?:寿命的影响.芨现成 年老鼠R麒:寿命缩短,而R麒:压积正常.主要是通 过加强造血来代偿R卫c寿命的缩短_{j.R烈:膜唾液 酸与RB(:寿命的关系不甚清楚.热而有证据表明老 化RBC的膜唾液酸含量减少.Dur~her证实.用神 ?224? 经胺酶(neurarninlda.se)去昧膜唾液酸后测定RBC寿 命缩短.提示该物质的减少是RBC破坏的一种机 制.al1ane观察到高胆固醇饮食造成高胆固醇血 癌同时发生了HA,认为RBC-T明显缩短是由于膜 磷脂含量减少,变形能力下降.易在脾内破坏 众所周知,脾脏是I生理性破坏的主要场 所Ferrant研究RBC的脾内通过时问(intrasp[enic transittime,s不)与RBC寿命的关系,结果发现HA 病人中两者呈匣比关系(r__u-096),sTT越长, MCL越短,提示sTT是反映HA病人脾脏破坏RBC 功能的一项有意义的指标]. 三,血库工作和免疫血液学 自Cr-RBC测定RBC寿命的方法建立以来,用 f研究RBC体内相容性试验一直是广太输血工作 者和血液学家f『1敏感*趣的课题...在没有该浩时, 用常规方法配合血液辖注后的效果观察只能根据有 无明显的溶血性输血反应和病人症状的改善与否等 临床征象来粗略了解.Pin~la应用”0-RBC直接而 清楚地显示了辖注的供者RBC在受者体内的存活 时间有些贫血病人困反复输血等原因.件内产生了 多种抗体,使配血发生困难.甚至有时用常规配血方 法找不到相容的供血者.在这种情况下Cr—RBC特 驯有价值.可用来选择括注后能存活某一允许时问 的相xttt~容的供者血液.既可满足临床需要,叉能避 免严重的溶血反应_8] RBC寿命测定昧用来帮助配血之外,对于血液 阼存和保养液的研究也有价值.关于库存血的冷 冻保存时间,常规标准是不超过6天ll.然而有些 时候需要冷冻保存6天以上,倒如某些需要输洼自 体血的情况.Rathbun研究了在AS-3营养液中库存 42天后叉冷冻保存8周的血液输注后的RBC存活 辜.结果表明.AS一3保养血液在42天之内任何时间 皆可冷冻保存以备所需,其RBC输注后的存活率完 全令人撼意. RBC寿命测定对于免疰血液学的研究也很有 刚.Panzer现察了因妊娠或辖血而在RBC上表达的 HLA抗原对RBC寿命的影响.十q自l倒MCL均缩 表明HLA抗体可造成RBC打i,0缩短.Contrer~s 参考 :l3IcsH.BrJHrnalol1980,45l659 :2刈米重夫临睐放射线l986.31(3);9 [3Ben:~mLJ.?其中脾破坏增加者占52,2.原因可 能有RBC本身质量低和单核巨嘴细胞系统对RBC 过度清除.Lhatula观察MDs病人的眦寿命,发现 比正常人缩短-.还有人测定自血病病人的RBC寿 命,结果也有缩短. Akmal测定慢性肾衰病人的RBC寿命,结旱显 示RBC—T显着缩短.其原因与继发性甲状旁腺功 能亢进,甲状旁腺激素水平增高有关.Kl1~na测 定先天性心脏墒患儿的RBC寿命,结果正常,认为 左一右分流的先天性心脏病与明显的溶血无关. 近午束.RBC寿命作为一项指标已应用于许多 学科的课题研究.Tatmk研究体外循环对RBC寿命 的影响.结果MCL缩短,证实体外循环对RBC确有 损伤.Ray探讨外科大手术中输注自体血的方法,显 示墒注的RBC寿命正常,认为该法安全实用,既降 低了对供者血的需要,叉减少了宿主抗移植物反应 和疾病传播【?.Sornchai发现患疟疾者愈后RBC寿 命仍短,茸机制并非由抗体或朴体介导,可能是疟原 虫感染非持异性激活了阿状由皮系统所致[“]. 结语 如上所连,RBC寿命测定当前已广泛应用于溶 血性疾病的诊断,贫血原因不明时的鉴别诊断,溶血 机制的捐{讨,HA病人药物治疗和手术治疗的敛果观 察,血库工作和免痤血液学的研究,以及其他许多学 科的研究,且新用途也处于不断的探讨中.cr标记 法测定RBC寿命较为简便易行,RBC寿命测定为血 液学和他许多学科提供了一项有意义的指标Ch- 标记法测定RBC寿命的不足之处为需刚梭素,需撤 体内试验和存在生物差异,cr还有逸脱.寻找非枝 索方法或体外应用枝索测定RBC寿命的试验日前 _r处于研究之中. 文献 r .6DFerranlAetalBtJHaema~1987t65(1)『3 :7]M.flnPL.nan啪j986,26(1),43 :8]veyRLnsfmm1985,25(6)l589 :9]Mare~aT…usjunt98.5,25f2)I183 [t03RathbunFM.etatTransitiont989,29I2l3 国外医学输血及血液学分册1991年第?卷第4期 [1【]c0nH髓丑日M.crIl1.BtJHacmar~1987.65(d)j475 [1?Lb~mlaR.&JHaematot1986.45Supptl48 [】3]AkmalM.nIl1.JCtinInvest1985,76(4)j1695 ? 225? (143RayJM,.Seine1986.1Jj879 [15)Sornch~L,HIl1.BtJEa~rnmoa1987,67I473 人红细胞血型糖蛋白:生物化学和抗原性质 Blanchard,D 人红细胞唾藏酸糖蛋白(SGes),也叫血型糖蛋 白(GPs),可通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝腔 电泳(s噼PAGE)继以过碘酸希夫氏反应染色 (PAS)鉴定.采用Laerrtmli的不连续缓冲系统电泳, PAS染色可检出4种GP:GPA,GPB.GPC和GPD GPs的PAS图谱复杂,因为GPs不能被SDS充分解 离.常以二聚体(AX2,BX2)和异二聚体(A+B)方 式泳动.可用各带洗脱物的再次电泳或双向电泳分 析各募聚物的组成. 血型糖蛋白的免疫化学 血型糖蛋白的纯化 田GPs唾藏酸含量高,用有机溶剂抽提红细胞 膜时.进入水相.用于抽提的有机溶剂有多种,但其 含大部分GPs的水相中,或多或少有杂蛋白. 为了获得不古杂蛋白的GPs,并有好的回收率, 作者采用65X3的酚/盐水抽提.得到含GPs的抽提 液;按FurtIurmyr等的方法凝胶过滤得GPA,混杂有 少量GPA的GPB+GPC组分,再上阳离子高效液 牛目层析(PLPLC)柱,Naa梯度洗脱.GPB被0.25M Naa首先洗脱.GPC在0.35MNaCI被冼脱.纯度在 80~85.可在表面活性剂存在下用HPLC柱凝胶 过滤进一步纯化达纯度.该法可以从一单位血 中纯化出足够量的GPB和GPC(分别为14Dnmol和 40nroo1)用于结构.因此适用于研究与这些分子 相关的稀有的血型变异型.因为酚/盐水抽提藏中不 古糖基化程度低的GPD,故GPD不能用此法纯化. 可用丁醇抽提和TSKG3000柱凝腔过滤层析获得富 含GPD和GPB的组分.再用制备性SDS-PAGE进 一 步纯化,获得可用于结构分析的GPD. 血型糖蛋白A的生物化学性质 GPA的坫恂GPA是主要的GP,从J单位红 细胞中可得ltamoleGPA纯品.故软早就巳测得其 131个氨基酸残基的完整序列.GPA是一种贯穿细 胞膜的蛋白质,由3部分构成,第一部分为糖基化的 膜外结掏域(1—72位氨基酸残基).第二部分为膜 中部分(73—95位氪基酸残基),第三部分为非糖基 化的胞浆内区段(93一J3J位氨基酸残基).N-末端 的膜外结构域通常连接有一个N-聚糖和J5个O 聚糖.大部分o_聚塘为四聚精,和丝氨酸或苏氨酸 相连,其结构为,唾液酸2—3半乳糖BI-3(唾液酸 葩一6)N-乙酰氨基半乳塘一丝氨酸/苏氨酸.尚有J J5的O-聚糖为三聚糖,其结构为:唾液酸兰!半 RI? 乳糖N-乙酰氨基半乳糖一丝氨酸/苏氨酸.N1 聚糖连结于天冬酰胺.其结陶为: 唾藏酸旦半乳糖乙酰氨基葡萄锖甘露糖 lal,6 甘露糖N乙酰氨基葡萄糖卫N乙酰氨基葡萄糖 唾液酸!堡半乳塘乙酰氟基葡萄锖旦甘天酰胺 GPA的N末端结构域含肯胰蛋白酶和木瓜蛋 白酶的作用位点,但用靡蛋白酶作用完整细胞.GPA 只部分破水解.与GPD相比,GPh的C末端与膜骨 架结台较弱. GPA的抗原性质GPA载有M和N血型抗 原.M.N抗原的结构差异在于GPAN未端的塘基 化五肽.因为大多数抗一M和抗一N抗体与抗原的结 台需唾液酸,推测M和N抗原有不同的唾液酰化 O一聚糖,M和N基因编码唾液酰转移酶.但某些抗 M和抗一N抗体与抗原的结合不需唾液酸.进而,M 和N抗原之间的差异被明确归国于J和5位氮基 酸的多态胜(M:丝氪酸/甘氨酸{N:亮氨酸/各氮 酸). 某些稀有个体表现为EI】(a一)表型,缺步GPA{ 可以产生与直接针对GPA的抗-M和抗一N抗体不 同的抗体(抗一En?).其抗原结构按其对蛋白水懈的 易感性分类:En?髑,En?Fs分别被胰蛋白酶无花果 蛋白酶水解.而En?FR抵抗无花果酶的水解.免疫