可溶性糖测定.doc

可溶性糖测定.doc 可溶性糖测定 作物可溶性糖的测定(蒽酮比色法) (也称还原糖)和双糖即蔗糖(也称非 还原糖)组成，它是植物体内一种重要的碳水化合物，在一般植物及植物产品中，测 定其含量多少，不仅能反映作物的生长状况，而且还能反映其品质。因此在植物分析 H H HOC COH CH—CH 脱水 HC CH—CH HC C—CHO + 3HO 22 O OH OH 然后，蒽酮与糖醛脱水、缩合，形成糖醛衍生物，呈蓝色，蓝色的深浅，可做为定量的 H H O C — C O + HC C—CHO O CH— CHOH 2 O 试剂配制 (1)准确称取1.000g葡萄糖溶于1升容量瓶中，此清液为1000mg/L，从此液中吸取0、1、2、4、6、8、10毫升注入100毫升容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，此溶液即0、10、20、40、60、80、100mg/L糖溶液，分别吸取系列糖液各2ml分别注入7个比色管中，按照试样测定的进行处理并比色，以横坐标表示不同的糖浓度，纵坐标表示光度计的相应光密度。绘出葡萄糖的标准曲线。 (2)01克蒽酮溶于100毫升72%的硫酸中，(每100毫升01%蒽酮溶液硫酸含量为比重184的浓硫酸74毫升)此试剂需新鲜配制，若在100毫升蒽酮试剂中加1 1提取:精确称取经磨细的干样品100毫克，置于一个15毫升的离心管中，加入10毫升80%酒精，在管口上盖一个塞子，保持在80,85?热水浴内，30分钟，取出离心，把上层清液轻轻移至一个50毫升烧杯中，照此法对残渣重复提取2次，以使可溶性糖提取完全。 把上述酒精提取液置于80,85?水浴上，使酒精蒸发，直到剩下3毫升液体为止。而后用蒸馏水定容至25毫升。作为可溶性 25毫升的糖提取液至一个25毫升容量瓶中，用蒸馏水定容，取2毫升此稀释的糖提取液至一个具有塞的比色管中，然后，沿管壁缓缓注入蒽酮试剂10毫 升，加 完后立即摇动半分钟，放入沸水浴中加热10分钟，取出后放入冷水中迅速冷却，待10分钟后，使之显色稳定，于620nm 结果计算 根据光密度读数，自标准曲线上查出含糖量(mg/L) -6可溶性糖%(克/100克干样)= mg/L×25×25/5×10/样品重×100 (1)不经分离而分别测定葡萄糖、果糖和蔗糖的蒽酮比色法基于以下两点:1.在50?下葡萄糖与蒽酮不显色，在此温度下果糖显色3分钟的消光度与果糖在100?显色35分钟的消光度几乎相等;2.稀碱与糖溶液共热时，可破坏葡萄糖和果糖，蔗糖不被破坏，因此，在不同温度不同条件下不同糖标准工作液的操作下，可以分别测出水溶性总糖、蔗糖、果糖 2