自制五虫散对大鼠局灶性脑缺血的影响

自制五虫散对大鼠局灶性脑缺血的影响 自制五虫散对大鼠局灶性脑缺血的影响 ?52?黑龙江医药科学2007年1O月第3O第5期 自制五虫散对大鼠局灶性脑缺血的影响 孙静,唐舜 (1.黑龙江中医药大学研宛生课程班,黑龙江哈尔滨150040~2.黑龙江中医药大学佳木斯学院,黑龙江佳木斯154007) 摘要:目的:探讨自制五虫散对大鼠脑缺血性脑损伤的影响.方法:采用大鼠大脑中动脉线栓(MCAO)法制备局灶性脑缺 血模型.将大鼠随机分为4组,高,低剂量五虫散荆组;空白对照组及西药雏脑路通对照组,4周后TTC染色测定脑缺血体积, HE染色进行脑组织病理组织学观察及脑组织含水量测定.结果:五虫散能使大鼠脑缺血面积减小,对脑组织含水量影响不 大.结论:中药自制五虫散对局灶性脑缺血大鼠脑组织有一定的保护作用. 关键词:自制五虫散;脑缺血;脑组织含水量 中图分类号:R285.5;R743.3文献标识码:A文章编号:1008—0104(2007)05,0052—01 脑缺血具有发病率高,死亡率高,致残率高等特点,是严2结果 重威胁人类健康的神经系统疾病,是人类三大主要疾病之 一, 仅次于心脏病及癌症,而且是致残的主要原因,因此,防 治本病具有重要的意义.目前,最佳的治疗措施为早期溶栓 治疗,减轻脑损伤,减少后遗症.但往往很难在可溶栓的时间 内及时将病人送到医院救治,因此,需要寻找更多更好的治 疗方法来救治病人,减轻脑损伤,减少后遗症.本实验旨在研 究自制五虫散对局灶性脑缺血大鼠的脑保护作用,减轻脑损 伤,减少后遗症. 1和方法 1.1实验动物及分组 成年雄性Wistar大白鼠(购于吉林大学实验动物中心) 4O只,体重250~300g.随机分为高剂量五虫散组,低剂量五 虫散组,空白对照组,西药维脑路通对照组,每组各1o只. 1.2药品及仪器 五虫散:由地龙,水蛭,僵蚕,土虫,蜈蚣,丹参,川芎等; 维脑路通:山西三九同达药业有限公司.KD一-25O8型切片 机:浙江省金华市科迪仪器设备有限公司;BX41系统显微 镜:北京中康医疗器械有限公司;电子天平:北京塞多利斯天 平有限公司BSl10S型. 1.3方法 ?大鼠脑缺血模型制备:术前禁食12h,不禁水.称重后, 经腹腔注射1O水合氯醛3.5mL/kg麻醉大鼠.将已麻醉大 鼠仰卧固定,颈部正中切口,分离右侧颈总动脉,颈外动脉, 颈内动脉,结扎颈总动脉,颈外动脉,绕颈内动脉穿线备用, 于颈总动脉分叉处切口并小心地向颈内动脉方向插入鱼线, 深度约18mm,直至稍感阻力,扎紧备线,造成大鼠局灶性脑 缺血模型,在手术部位滴加青霉素钠溶液,逐层缝合皮肤.? 给药:动物清醒后灌胃给药,每日2次,高,低剂量五重散组分 别给药2g/kg,0.5g/kg,维脑路通片组20mg/kg,连续给药4 周.?脑缺血体积比测定:末次给药1h后处死动物,迅速断 头取脑.放人一2O?冰箱,2min后取出,在嗅球后3,5,7,9, l1,13处切片制成厚约2mm的冠状切片6张,放人准备好的 2TTC染色液中,37?避光孵育60min,缺血部分不着色, 不缺血部分染成红色.按固定比例进行正反两面拍照, photoshop软件测定各切片正反两面的缺血面积,正反两面 面积相加除以2所得平均值再乘以厚度,得出缺血灶体积的 近似值,计算缺血部分的百分比.?脑组织含水量测定:将动 物断头处死后,立即取脑,除去嗅球,脑干及小脑,分别取左, 右脑半球样本称重,然后放人烤箱内至恒重,再次称重.脑含 水量=[(湿重一干重)/湿重]×100%.脑组织病理组织学观 察:将动物处死后,立即取脑,将标本用1O甲醛溶液固定, 脱水,常规石蜡包埋,切片,HE染色,光镜下进行组织病理观 察. 1.4统计学处理 数据以;士s示,组间差异比较用t检验. 作者简介:孙静(1975,)女,黑龙江佳木斯人,讲师,学士. 2.1五虫散对阻断大脑中动脉所致的局灶性脑缺血大鼠脑 缺血面积和脑组织含水量的影响 见表1. 表1五虫散对阻断大脑中动脉所致的局灶性脑缺血大鼠脑 缺血面积和脑组织含水量的影响(x士s,,n=10) .与空白组比较具有显着性差异(P<o.05). 2.2五虫散对阻断大脑中动脉所致的局灶性脑缺血大鼠组 织形态学的影响 病理结果表明,空白对照组镜下可见缺血坏死区,坏死 部分脑组织结构疏松,神经元只留有轮廓,或胞体为三角形, 胞质嗜伊红明显增强,胞核固缩,溶解或消失.西药对照组可 见脑缺血坏死区,坏死区神经元呈变性坏死改变.五虫散高 剂量组,多数动物看不到明显脑缺血区,皮质神经元与胶质 细胞分布无异常,绝大多数神经元胞体呈椭圆形,胞核圆形, 核仁清晰,胞浆无明显嗜伊红改变,但有少数散在神经元变 性坏死.低剂量组,脑组织缺血区很少,有少数散在的神经元 呈变性坏死改变. 3讨论 脑血管疾病预防和治疗的临床和实验研究已成为当今 世界医学研究的重要课.大脑中动脉为血栓常发部位,缺 血性脑血管疾病多发生大脑中动脉,因此逆转或改善缺血后 诸多变化是药物治疗的主要目标.模拟人局灶性脑缺血动物 模型最好通过阻断大脑中动脉而复制.所以我们采用阻断大 鼠一侧大脑中动脉来观察五虫散的作用.中医理论认为,中 风的病位在心脑,与肝肾密切相关.气虚血瘀夹痰是缺血性 中风的主要病因病机,血瘀是病理核心,气虚是根源.五虫散 具有益气活血,化瘀祛痰,通经活络的作用.地龙,水蛭破血 逐瘀,通经活络,有增加脑循环,抗血栓的作用,且水蛭肽还 有抗脑缺血,保护神经元,减轻神经损伤的作用.丹参补血, 活血化瘀,具有抗缺血缺氧,抗自由基等作用,对神经细胞具 有保护作用.因此,五虫散对局灶性脑缺血性脑损伤有一定 的保护作用. 参考文献t [1]邱芬,刘勇.川芎嗪对成年大鼠局灶性脑缺血后海马齿状回细胞 增殖的作用[J].南方医科大学,2006,26(10):1400—1402 [2]许国振,胡锡元.太极通天液对实验性脑缺血的保护作用[J].中 成药,1999,21(3):141—142 [3]王本祥.现代中药药理学EJ].天津:天津科学技术出版社,1997, 927—11O3 (收稿日期:2007一O9—28)