乙醇对小鼠原代肝细胞脂肪酸氧化速度的影响【论文】

乙醇对小鼠原代肝细胞脂肪酸氧化速度的影响【】 乙醇对小鼠原代肝细胞脂肪酸氧化速度的影响 乙醇对小鼠原代肝细胞脂肪酸氧化速度的影响 【摘要】 目的 建立小鼠肝细胞的体外培养，同时检测乙醇对肝细胞脂肪酸β-氧化速度的影响。方法 采用戊巴比妥麻醉小鼠，通过肝脏灌注和胶原酶消化分离小鼠肝细胞，接种于胶原包被的培养皿中进行体外培养。通过HE染色观察细胞的生长状态。在20mmolL乙醇存在的情况下，通‎‎过3H标记的棕榈酸(C16:0)检测肝细胞的脂肪酸氧化速度。结果 成功地分离了肝细胞，肝细胞的存活率?95%。肝细胞在体外培养48h仍能够保持良好的生长状态。对肝细胞脂肪酸氧化速度的研究发现，20mmolL酒精能够导致肝细胞的脂肪酸氧化速度降低40%左右，导致肝细胞中脂肪含量增加。结论 本研究成功地建立肝细胞的体外培养方法，采用3H标记的脂肪酸能够敏感地检测脂肪酸氧化速度，而研究发现乙醇能够抑制肝细胞脂肪酸氧化速度。同时，本研究结果为肝细胞的脂肪和糖类代谢的研究提供了实验条件。 【关键词】 乙醇;肝细胞;脂肪酸 The effet of ethanol on fatt aid oxidation of mie primar hepatotes 【Abstrat】 Objetive To isolate the mie primar hepatotes‎‎，and the ells ere ultured in vitro.The influene of ethanol on fatt aid β-oxidation veloit as measured.Methods The mouse as anesthetized ith pentobarbi‎‎tal，and the liver as degested ith ollagenase.The primar hepatotes ere in‎‎oulated in ollagen-oated dishes.The morpholog of ultured primar hepatotes as o‎‎bserved b HE staining.The fatt aid β-oxidation as measured using ,9，10-3H, palmiti aid as a traer.Results The primar hepatotes ere isolate‎‎d and ultured suessfull，and the viabilit as more than 95%.20mmolL ethanol ould redue the speed of fatt‎‎ aid β-oxidation about 40%，and lead to the inreased lipid level in hepatotes.Conlusion We isolat‎‎ed and ultured the mouse primar hepatotes in vitro，and the influene of ethanol on fatt aid β-oxidation as determined.This stud is helpful for the researh on the lipid (乙醇对小鼠原代肝细胞脂肪酸氧化速度的影响来 metabolism in liver. 【Keords】 ethanol;hepatote;fatt aid 肝脏在脂肪、糖和蛋白质的代谢过程‎‎中具有重要的作用。在体内肝细胞的代谢受到各种因素的影响。酒精‎‎在人肝细胞中主要由乙醇脱氢酶和过氧化氢酶代谢成具有细胞毒性的乙醛，然后由乙醛脱氢酶代谢为乙酸。在这个过程中，肝脏的糖脂代谢将受到影响。本研究通过体外分离肝细胞和培养，研究乙醇对肝细胞的脂肪酸氧化速度的影响。 1 材料与方法 1.1 材料 C57BL6小鼠由第四军医大学实验动物中心提供;戊巴比妥钠、胶原酶、胰岛素‎‎、异丙肾上腺素，棕榈酸为Sigma公司;,9，10-3H,Palmiti‎‎ aid为Amersham Biosiene产品;Hisafe 3闪烁计数液为PE公司产品。