红细胞不
抗体筛选
红细胞不规则抗体筛选、鉴定
(凝聚胺介质法)
不规则抗体检查也称红细胞抗体检查。所谓不规则抗体是指不符合ABO血型系,,,,,,,,,,,法则的血型抗体,也就是抗,、抗,以外的血型抗体。ABO系中的亚型,变异型抗 ,1或某种抗,等抗体,也称为不规则抗体。其多为IgG抗体。主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生,在盐水介质中不能凝集而只能致敏相应抗原的红细胞,必须通过特殊介质(酶、抗人球蛋白、,,,,,,,,,等),才能使致敏红细胞出现凝集反应。临床上通常所称的“同型血”实际上是指ABO血型系统和Rh血型系统相同,其它红细胞血型系统未必相同。如果交叉配血不仔细,或者只用盐水介质配血,则有可能检查不出ABO血型系统之外的不规则抗体,而此抗体与相应抗原发生免疫反应,可导致溶血性输血反应的发生。
红细胞血型抗体检查适用于下列情况:1、ABO血型鉴定发现受检者血清中有意外抗体时;2、供血者血清抗体筛检;3、输血前受者血清抗体检查;4、输血后溶血反应疑为由同种抗体引起时;5、孕妇血清的抗体检查;6、新生儿溶液血病婴儿血液中抗体检查;7、直接抗球蛋白试验阳性红细胞上抗体的检查。 【原理】
利用筛选细胞(?、?、?)上存在的多种红细胞抗原与被检血清在凝聚胺介质中反应,如果出现凝集
示血清中存在不规则抗体。
【器材】
试管、吸管、载玻片、离心机、记号笔、显微镜
【试剂】
1(5%筛选细胞(?、?、?)
2(凝聚胺试剂
【标本】
外周血或静脉血
【操作步骤】
1、取试管三支,标明?、?、?并往各管加病人血清(血浆)2滴,加5%筛选细胞(?、?、?)各1滴。
2、各加LIM0.7ML,混合均匀后,再各加Polybrene 溶液2滴,并混合均匀。
3、用BASO专用离心机1000G离心力,离心10秒,然后把上清液倒掉,不要沥干,让管底残留约0.1ML液体。
4、轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重作。
5、最后加入Resuspending 2滴,轻轻转动试管混合并同时观察结果。如果凝集散开,表示是由Polybrene引起的非特异性聚集,抗体筛检结果为阴性;如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应,抗体筛检结果为阳性,应进一步作抗体鉴定。
【临床意义】
虽然不规则抗体筛选阳性率仅为0.37%,但是该项阳性的患者一旦输入具有相应抗原的红细胞,抗原、抗体发生免疫性结合,在补体的参与下,使输入的红细胞发生溶解,即发生溶血性输血反应。患者出现发热、贫血、黄疸和血红蛋白尿,严重时甚至危及其生命。因此,在输血中要经常警惕这种输血反应发生的可能性。当不规则抗体筛选阳性时,必须进一步作抗体鉴定,确定其特异性后,再输入无相应抗原的红细胞,才能达到安全输血之目的。
新生儿溶血病(,,,)也是由于母亲体内存在着与其胎儿红细胞不配合的,,,性质的不规则抗体,引起的同种被动免疫性疾病。凡是以,,,性质出现的不规则抗体,理论上都可以引起,,,,因为,,,性质抗体能通过胎盘进入胎儿血循环,破坏胎儿红细胞,引发胎儿水肿、黄疸、贫血和肝脾肿大,甚至并发核黄。因此对有输血史或妊娠史的孕妇也应作不规则抗体筛选,若检测出不规则抗体,应作出相应的预防和治疸
疗。,,血型中,抗原的抗原性强于,抗原的抗原性,因此产生抗 ,抗体的几率大于抗-,抗体。抗 ,1抗体为,亚型中不规则抗体,它的存在提示我们在注意,,,血型以外的不规则抗体的同时,也应高度重视,,,亚型中的不规则抗体,因为它也是引起溶血性输血反应的一个因素。抗,抗体为冷凝集素,很少在37?有活性,一般在体内不能引起溶血反应,但患者处于低温麻醉状态下手术时应注意,因为此类抗体可激活补体。当机体的体温在冷抗体最适反应温度范围内(4,20?)时,可发生溶血反应。
不规则抗体产生大多为,,血型系统,除抗,外,其他如抗,,抗,;,抗,,检出率占,,系统67.8%,提示,,阳性患者输血也可引起溶血反应,且机率较高.根据我国汉族人群,,抗原分布特点,,抗原阳性比,抗原阳性低,产生抗,抗体的机率高于抗,抗体,故,,血型系统,抗原阳性,抗原阴性者输血不容忽视.,,阴性个体免疫后产生抗,的机率为70.9%,产生的抗体其效价在体内会逐渐下降,甚至常规试验会漏检,若以后作为受血者输入,,(,)阳性血刺激时,会很快出现免疫性回忆反应.抗体效价会在1,2,,内达到高峰,引起迟发性血管外溶血,且发生在输血后几天.造成的输血无效以及溶血,易被临床忽视.溶血反应的强度与抗体效价成正比关系,抗体产生的强度增加溶血反应愈严重.抗,、抗,,,、抗,1均较少见,但抗,,,抗体可引起严重的溶血性输血反应,所以不能作为供血者,如为受血者时应给,,(,-,-)血液输入.抗,抗体只有37?或抗球蛋白试验出现阳性时才具有临床意义.抗,1最理想的反应温度为4?,偶可在37?查出.抗,1抗体很少在体内造成溶血,几乎总是,,,型抗体,所以不能通过胎盘,不会造成,,,.冷凝集素在配血时可忽略.自身抗体在自身溶血性贫血时出现较多,一直以来是输血的一大难题,我们仍遵循一般输血原则.
综上所述,不规则抗体是引起溶血性输血反应和新生儿溶血病的主要因素之一, 对输血发生溶血性反应所引起肾衰、死亡病例的诊断有临床意义。因此为了保证输血安全,提高输血疗效,减少或杜绝溶血性输血反应的发生,不规则抗体检查必须作为输血前检查的重要项目之一