生物梅里埃第4代HIV初筛试剂假阳性率增高问题的探讨

生物梅里埃第4代HIV初筛试剂假阳性率增高问的探讨 生物梅里埃第4代HIV初筛试剂假阳性率 增高问题的探讨 卫生检疫杂志2007年4月第30卷第2期ChineseFrontierHealth?73? [实验研究与疾病监测] 生物4代HIV初筛鼢IJ假阳性率噌高问题删 殷竹君杨启生田玲玲轩芳赵久红 (江苏国际旅行卫生保健中心,南京210o01) 摘要[目的]寻求更为敏感和特异的用于出入境人群的HIV初筛检测方法或检测流程,及时准确出具HIV抗 体检测报告.[方法]从本中心HIV确认实验室的送检标本中,选取经免疫印迹法(WB)确认为HIV抗体阳性标本30 份,和经WB法确认为阴性及不确定标本30份,分别用生物梅里埃和丽珠试剂同时做ELISA法筛查,比较其阳性率. 分析比较近3年来由于生物梅里埃试剂换代,确认实验室送检样品阳性检出率情况.[结果]生物梅里埃试剂在用于 HIV初筛检测中假阳性率高于丽珠试剂.随着梅里埃试剂由第3代更换为第4代,其检测假阳性率提高显着.[结论] 用于出入境人群的HIV初筛检测试剂应选择敏感性高,特异性高的试剂;在保证结果准确的情况下,可以应用《全国艾 滋病检测技术规范(20o4年版)》第2章HIV抗体检测中的替代策略3,以便快速准确地出具HIV检测报告. 关键词HIV;试剂盒,诊断;假阳性率 [中图分类号]R512.9[文献标识码]B DiscussionontheIncreasedFalsePositiveRateofBio-MerieuxIVReagentkitforH?ScreenYinZhujun,YangQisheng, TianLingling,XuanFang,ZhaoJiuhong.JiangsuInternationalTravelHealthCareCenter,N anjing210001,China [Abstract]ObjectiveTofindmoresensitiveandspecificmethodsandinspectproceduresofthetestofHIVscreenamongthe entry-exitpersonnels.MethodsAmongallofsamplestestedinHIVconfirmlab,inwhich,30HIV-positivesamples,30HIV-negative andHIV— uncertainsampleswerechosen,meanwhiletheywereconfirmedbyWB.Allthesamplesweredetectedwithdifferentreagents ofBio— MefieuxandLizhurespectivelyincomparisonofthepositiverates.ThepositiverateswereanalyzedbecauseoftheBio—Meneux reagentupdateResultsThefalsepositiverateofthereagentsfromBio— MefeuxwashigherthanthatfromLizhu.Thefalsepositive ratewasincreasedsignificantlyafterreagentsupdate.ConclusionMoresensitiveandspecificreagentsshouldbeselectedforthetest ofHIVscreenamongtheentry— exitpemonnels.AccordingtotheNmionalGuidelineforDetectionofHIV/AIDS(20o4),thesecond chaperofreplacingpolicyHIcouldbeusedfortheentry-exitpemonnelsmoreco~ecflyandrapidly. [Keywords]HIV;Reagentkit,Diagnose;Falsepositiverate 生物梅里埃公司的HIV试剂被广泛用于国境口 岸出入境人群HIV初筛已有6年,该试剂以其良好 的品质为国境口岸传染病监测工作提供了可靠的依 据.试剂也在不断发展和完善,目前初筛用的HIV EUSA试剂已经发展到第4代.但随着试剂的更新 换代,即2005年上半年第4代试剂的应用,ELISA 检测结果的弱阳性例数明显增多.笔者所在的HIV 确认实验室接收到的ELISA阳性标本,经WB确认 为阴性或不确定的样本例数也在增多,而且往往WB 不确定样本经2次3个月连续跟踪,最后也排除了 HIV感染.梅里埃HIV初筛试剂是否存在假阳性率 增高问题?为此我们将最近3年HIV确认数据进行 统计分析,并选择经2005年卫生部临床质量评估的 另一敏感性和特异性均高的丽珠公司试剂作了对比 性研究.现将结果报告如下: 1对象与方法 1.1实验对象30份送检样品,经蛋白印迹法 (WB)确认为HIV阳性;30份送检血样,经WB法确 认为阴性或不确定,不确定样品连续追踪2次3个 月,最终排除HIV感染. 1.2实验试剂60份样品HIV确认实验WB试剂盒 由美国GENELABLSDIAGNOSTICS公司生产. ELISA法HIV初筛试剂分为2组;实验组为常规用于 出入境人群的由荷兰生物梅里埃有限公司生产的试 剂,对照组试剂由丽珠公司生产.上述2种试剂在卫 生部2005年全国HIV抗体诊断试剂临床质量评估的 结果为:2者在敏感性和特异性上没有显着性差异. 1.3实验仪器全自动酶标仪BRIO,由意大利希 亚克公司生产;SDB一50恒温摇床. 1.4实验方法 1.4.1蛋白印迹法(WB)实验样品的选择决定于 WB法的检测结果,并以此作为"金标准". 1.4.2酶联免疫吸附试验(ELISA)30份WB法检 测结果HIV抗体阳性和30份HIV抗体阴性或不确 定样品分别用生物梅里埃和丽珠试剂再次做ELISA ? 74?卫生检疫杂志2007年4月第30卷第4期 ChineseFrontierHealthOuarantineAor.2007.Vol30 初筛试验. 1.4.3数据分析统计近3年HIV抗体送检血样品 的确认阳性率. 2结果 2.12种试剂检测结果比较实验组生物梅里埃和 对照组丽珠试剂对30份WB法检测结果HIV抗体 阳性和30份HIV抗体阴性或不确定样品检测的结 果为:两者30份阳性样品的检测结果是一致的;而 对30份阴性及不确定样品的检测中出现了明显的 不一致,实验组出现了多份假阳性,而对照组的假阳 性为1份. 2.2近3年确认阳性率变化近3年送检血样HIV 抗体的确认阳性率,为2004年67.74%,2005年和 2006上半年分别为3333%和23.53%,阳性率随年份 有所下降,2004—2005年有一个明显的下降(图1). 一 鼹 彗 疑 :? 嚣 3讨论 3.1存在初筛假阳性率增高问题从图1中可以 看到2004—2Oo6上半年,确认实验室的送检样品的 阳性检出率在下降,而且从2004—2005年有一个明 显的下降.阳性率的下降是由于初筛的假阳性增多 造成的.2005年上半年恰好是检验检疫系统内HIV 初筛试剂由第3代更换为第4代.由于确认阳性率 的下降明显,而采用同一试剂的不同检测时间2005 年和2006上半年均出现较低的确认阳性率,因此, 可以认为第4代试剂与确认阳性率的下降有相关 性,换而言之,即第4代试剂的初筛假阳性率在增 高.造成第4代试剂的初筛假阳性率增高的因素还 有待进一步研究. 3.2初筛假阳性率增高而引发的问题在HIV确认 问题上我国有严格的检测技术规范.一般采用的流程 是第1次初筛阳性,重新采血再用原检测试剂和另一 种原理的检测试剂进行复检,如果结果出现1阴l阳 就要送确认实验室.根据本确认实验室多年来的检测 数据显示,ELISA筛查OD值较低的阳性样品送检确 认,结果有少部分被确认为阴性,而更多的是出现不 确定结果,必须经过2次3个月再次采血复检而排 除.这种不确定的结果是什么原因造成的,目前未见 有研究报道.由于,WB不确定结果最终通过漫长的时 间和繁琐的检测程序才能排除HIV感染,因此,这种 初筛假阳性带来的一系列问题是严重的.首先给受检 者心理上造成压力,而且这种压力不能在短时间内得 以解除,因为漫长的排除检测时间要6个月.其次,让 受检者失去很多机会,造成了经济和精神上的巨大损 失.出入境人员是一特殊人群,他们往往因出国研修 或工作的需要而来体检,他们等待出具报告的时间是 有限制的,而漫长的复检会使他们失去工作或研修机 会,给工作和经济上带来损失;再由于同事的不理解 或其它原因也给他们精神上带来伤害.此外,对于出 入境人员来说,如果经过漫长而复杂的检测程序最终 出具的是阴性报告,客观上造成人们对检测水平与工 作效率的不信任.假阳性例数的增多送检确认也会造 成了资源的浪费.假阳性可能还会带来其它有待进一 步研究的负面影响. 3_3假阳性问题的解决与建议目前,用于HIV 初筛的试剂,无论进口还是国产试剂,技术都趋于成 熟,加上《全国艾滋病检测技术规范(2004年版)》的颁 布,为我们快速出具准确的HIV阴性报告提供了技术 上的依据.《全国艾滋病检测技术规范(2004年版)》第 2章HIV抗体检测中的替代策略3可以为解决假阳 性问题开辟另外的检测程序.替代策略3是用于一般 人群艾滋病自愿咨询检测C1r)的检测程序,它不同 于原检测流程的是:在高敏感性筛查试剂1出现阳性 的情况下,可以用高特异性筛查试剂2和高特异性筛 查试剂3进行复检,如果高特异性筛查试剂2和高特 异性筛查试剂3均出现了阴性结果,就可以出具"HIV 抗体阴性"报告,反之情况则送确认检测.这一点非常 值得关注,也非常实用,尤其出入境人群,需要快速准 确出具HIV检测报告时.替代策略3为解决一些实际 存在的问题提供了便捷的方法和依据. 参考文献 1潘阳杏,朱红,张绍福,等.艾滋病第四代诊断试剂临床评估初探. 中国国境卫生检疫杂志,2004,6:327—328 2张亚琴,张奕琴.梅里埃试剂初筛抗一HIV中假阳性的预防及纠正. 现代医药卫生,2006,13:2039—2040 3许四宏,李秀华,宋爱京,等.第4代HIV抗原抗体联合检测试剂的 评价.中国输血杂志,2006,3:188-191 4卫生部.全国艾滋病检测技术规范【S】.2004年版.北京:人民卫生出 版社,2004 [收稿日期:2006—09—18] ???????? ??????