从江牛带绦虫感染家猪后血清il.doc

从江牛带绦虫感染家猪后血清IL-4和IL-10含量的 动态变 【摘要】 方针:不雅观察家猪感染从江牛带绦虫后血清细胞因子IL-4和IL-10含量的 转变，从细胞因子角度探讨抗从江牛带绦虫感染免疫应答的机制。体例:用从江牛带绦虫虫 卵直接灌胃20 d龄健康乳猪5头，并以健康乳猪5头作对比，于感染后第7、15、45和60 天,定期抽取家猪耳缘静脉血，通例涣散血清。用ELISA试剂盒检测血清细胞因子IL-4和 IL-10含量。功效:正常组血清IL-4和IL-10含量在感染分歧时代根柢处于安定水平;实施组 血清IL-4和IL-10含量在感染第7天起头上升，第15天最高，第45天含量与正常组相等， 第60天再次上升;与正常组对比，实施组血清IL-4和IL-10含量在第7、15、和60天时较 着升高(P<0.01)。结论:家猪感染从江牛带绦虫分歧时代血清IL-4和IL-10含量转变较年夜。 第7和第15天血清出现高水平IL-4和IL-10，提醒体液免疫在抗从江牛带绦虫早期感染中 发挥着严重浸染;第45天，IL-4和IL-10含量与正常组对比，提醒从江牛带绦虫感染家猪中 期体液免疫应答转变不年夜;第60天，高含量的IL-4和IL-10，概略是囊尾蚴诱导肝纤维化 形成的严重身分。 【关头词】 从江牛带绦虫;细胞因子;执行动物感染;家猪 Examination of the serum IL-4 and IL-10 in domestic pigs infecteted with taenia saginata asiatica LIU Yuan-zhong,YANG Peng,XIE Hong-shu (Qiannan Medical College, Duyun 558003,China) 【Abstract】Objective:To detect chanism of immune response of domestic pigs against Taenia Saginata asiatica infection through oberserving change of serum IL-4 and IL-10 in domestic pigs experientially infected with Taenai Saginata asiatica. Methods:Five healthy pigs were fed with eggs of Taenai Saginata asiatica,and reared isolately in animal center,to establish Taenai Saginata asiatica infection model ,and normal controls.Vein blood of pigs were adopted at day 7,15, 45and 60 after infection and collected serum.Serum IL-4 and IL-10 were detected by ELISA Results: The level of serum IL-4 and IL-10 of normal group maintained relatively be stable through out the experiment.The serum IL-4 and IL-10 level of infection group began to rise at day 7 , the highest at day 15, and increasing again.Compared with the normal group ,infected group IL-4 and IL-10 showed a great increase at day 7 and day 60. Conclusion:Serum IL-4 and IL-10 level showed biphasic difference among difference infection stage. High level of Sera IL-4 and IL-10 at early infected stage suggested that immune response was very important role against Taenia Saginata asiatica at early infected stage.Constant level of IL-4and IL-10 at day suggested that immune response-associated antigen deceased.IL-4 and IL-10 might be one important factor in induced liver fibrous in late infection stage. 【Kek words】Taenia saginata asiatica;cvtokine;expermental animal infection; domestic pigs 现在对牛带绦虫的研究仅规模于形态学、生物学等方面，有关宿主抗牛带绦虫感染的研 究报道少见。本研究拟用从江牛带绦虫实施感染乳猪，动态不雅观察感染从江牛带绦虫的家 猪血清IL-4和IL-10含量转变，从细胞因子角度探讨家猪抗从江牛带绦虫感染免疫应答机 制，现将功效报道如下。 1 质料与体例 1.1 质料 1.1.1 实施虫体的泉源用槟榔、南瓜子对贵州省从江县绦虫病流行区的2例已确诊的绦 虫病患者进行驱虫，获得两条完整虫体经形态学剖断为从江牛带绦虫。 1.1.2 虫卵悬液制备 将上述驱出的绦虫用两套细小针头剖开孕节子宫，离心收集虫卵， 3 000 r/min×15 min,专心理盐水离心洗涤4次，调剂虫卵浓度至15万/ml。 1.1.3 执行动物 20 d龄三元杂交猪10头，牝牡并用，由贵阳市种猪滋生场供给。经粪 检、驱虫和间接血凝实施证实无在囊尾蚴感染。 1.1.4 试剂 IL-4和IL-10的试剂盒，由浙年夜生物基因有限公司(系美国Rapid BioLab.公司进口分装)供给。 1.2 体例 1.2.1 分组及处置 将20 d龄三元杂交猪随机分为实施组和正常组各5头。实施组每头 灌胃1 ml(15万/ml)，斗劲组不感染。两组乳猪均操纵专用膨化颗粒饲养，隔离圈养，提防 自然感染。 1.2.2 血清细胞因子含量测定 实施组及正常组分袂于感染后第7、15、45和75天分别抽取5 ml静脉血，离心取血清，置-20?冰箱保留，用ELISA法测定血清IL-4和IL-10的含量。 1.2.3 统计学处置 数据用SPSS13.0统计软件进行处置，数据用x?s浮现，两组均数的斗劲接纳方差剖析。 2 功效 2.1 家猪感染从江牛带绦虫后血清IL-4含量的动态转变用ELISA法检测家猪血清IL-4含量水平，正常组血清IL-4含量根柢处于安定水平。实施组血清IL-4含量在感染第7天升高，第15天达岑岭，第45天与正常水平相等，第60天再次升高。与正常组对比，实施组血清IL-4含量在感染第7、15和60天时较着升高(P<0.01)，见1。表1 家猪感染从江牛带绦虫后血清IL-4含量注:*与斗劲组斗劲，P<0.01。 2.2 家猪感染从江牛带绦虫后血清IL-10含量的动态转变 ILESA 法检测家猪血清IL-10含量水平，正常组血清IL-10含量，根柢处于安定水平。实施组血清IL-10含量在感染第7天升高，之后火速下降略高于或低于正常组，第75天时再度升高。与正常组对比，实施组血清IL-10含量在感染第7和15和75天时较着升高(P<0.01)，见表2。表2 家猪感染从江牛带绦虫后血清IL-10含量注:*与斗劲组斗劲，P<0.01。 3 谈判 在寄生虫感染免疫中，细胞因子作为介质，既介入体液免疫应答也介入细胞免疫应答，宿主的免疫提防病理损害都受到细胞因子调控。良多研究功效[1-2]浮现宿主免疫力在从江牛带绦虫六钩蚴感染中发挥着严重浸染。本研究经由过程不雅观察感染从江牛带绦虫的家猪血清IL-4和IL-10含量的转变，发现从江牛带绦虫感染家猪第7天和15天，IL-4和IL-10含量远高于正常组，高含量的IL-4和IL-10可以促进Th0向Th2转化，Th2细胞标的目的于渗出IL-4、IL-5和IL-10等，与B细胞的增殖、成熟和促进抗体生成有关[3]。由此可见，在家猪感染从江牛带绦虫早期，以Th2细胞应答优势为主。Th2细胞应答优势主要浮现血清抗体含量增添，特异性体液免疫应答增强。 家猪感染从江牛带绦虫第45天，从江牛带绦虫六钩蚴在肝脏已发育成熟，因为年夜量新抗原的出现，宿主应处于较高免疫应答。本研究浮现，此时血清IL-4和IL-10含量与正常组区别不年夜，提醒特异性体液免疫应答处于正常水平。其缘故原由概略是从江牛带绦虫六钩蚴在形成囊尾蚴的历程中释放一种可溶性卵白诱导宿主发生免疫耐受有关。徐宏秀等[4]在脑囊尾蚴病患者Th2型细胞因子的研究发现，脑囊尾蚴病患者血清IL-4和IL-10含量较着升高。因为脑囊尾蚴病患者体内虫体以囊尾蚴形式存在，从理论上说应该与从江牛带绦虫感染家猪中期的实施功效齐截，但实施功效差别较年夜，这种差别是否为带绦虫寄生的中心宿主分歧所造成?还有待于进一步研究。 在研究从江牛带绦虫感染家猪病理学不雅观察中发现，家猪感染从江牛带绦虫第75天后，囊尾蚴已经周全钙化，肝机关以肉芽肿和肝纤维化损害为特征。此时，血清IL-4和IL-10细胞因子含量再次很是增高，高表达IL-4和IL-10，真相有何意义?它的存在是否与肝纤维化形成有关?Cheerer 等[6]在感染日本血吸虫小鼠体外实施研究中发现，IL-4与纤维化形成慎密亲密相关。朱华斌等[7]在Th2细胞因子在日本血吸虫小鼠肝脏中的转变及其与纤维化的斗劲中发现，IL-4和IL-10在血吸虫肝脏肉芽肿及纤维化形成中起严重浸染。由此我们猜测，高表达的IL-4和IL-10概略在诱导肝机关形成肉芽肿和肝纤维化历程中发挥着严重浸染。但也有报道浮现，脑囊尾蚴病变机关的坏弃世和炎症反映以完整弃世虫组最较着，伴有纤维机关增生时，病变机关的坏弃世和炎症反映更为严重，猜测来历因概略是虫体弃世亡后释放年夜量新抗原有关[8]。 【参考文献】 [1] Ito A,Fan pc,Chung WC ,et al.Cross protection against Taenia taeinaefrom is in rats vaccinated with non-viable oncosphere of Asian Taenia or T.saginata [J]. Journal of Helminthology,1994，68(4):83-85.