甘油果糖注射液细菌内毒素检查法的建立

甘油果糖注射液细菌内毒素检查法的建立 甘油果糖注射液细菌内毒素检查法的建立 作者:孟丽丽， 张琳， 叶琳， 龚文明， 邓骥 【关键词】 甘油果 糖注射液;细菌内毒素;热原 摘要:目的研究甘油果糖注射液细 菌内毒素检查(BET)的干扰实验，建立用(BET)代替热原检查(PT)。 方法根据《中国药典》2005年版?部收载的细菌内毒素检查法的要 求进行实验。结果将甘油果糖注射液经2倍稀释可消除干扰因素，用 标示灵敏度为0.25EUțml-1 的鲎试剂细菌内毒素检查是有 效的。结论可以用细菌内毒素检查法代替家兔法来控制甘油果糖注射 液的质量。 关键词:甘油果糖注射液; 细菌内毒素; 热原 Abstract:ObjectiveTo study the interference factors of BET for glycerol and fructose injection and establish a method for bacterial endotoxin test(BET)instead of the pyrogen Test(PT).MethodsThe experiment was implemented according to the loacterial test endotoxins in China Pharmacopoeia (?,2005ed).ResultsThe test showed that the interference elements could be excluded by diluting glycerol and fructose injection 2 times,and it was effective that endotoxin could be tested by amebocyte lysate with accuracy of 0.25EU/ml.ConclusionBacterial endotoxin test can be used in place of rabbit method for pyrogen monitor of glycerol and fructose injection. Key words:Glycerol and Fructose Injection; Bacterial endotoxin; Pyrogen 甘油果糖注射液为含有甘油、果糖和氯化钠的注射液，是安全而 有效的渗透性脱水剂。主要适用于脑血管病、脑外伤、脑肿瘤、颅内 炎症及其他原因引起的急慢性颅内压增高、脑水肿等症。《中国药典》 2005年版?部规定该注射液用家兔法做热原检查。细菌内毒素检查 法检查药品中的细菌内毒素，与传统的家兔法相比，具有灵敏度高、 重现性好、样品用量少、时间短、费用低等优点，本实验探讨以细菌 内毒素检查法取代热原检查法检测甘油果糖注射液的可行性。 1 试药与仪器 1.1 试药鲎试剂(TAL)，灵敏度0.25EUțml-1，规格0.1 ml/支，批号050715， 厦门鲎试剂厂;灵敏度 0.25EUțml-1，规格0.1 ml/支，批号050820，湛江安度斯生物有限公司。细菌内毒素工作品，10EU/支，批号050621， 厦门鲎试剂厂。细菌内毒素检查用水(BET水)，2 ml/支，批号050110，厦门鲎试剂厂。甘油果糖注射液 :250 ml，批号051011，0503，0529， 西安万隆制药有限公司。 1.2 仪器电热恒温水浴箱(江苏沙洲医疗器械厂);旋涡混合器(上海沪西分析仪器厂)。实验用玻璃器皿经180?烘烤2 h以上。 2 方法与结果,1, 2.1 样品细菌内毒素限值确定根据L=K/M，其中K=5.0EUț(kgțh)-1，它是细菌内毒素的致热阈;M为本品热原检查的兔剂量,2,10 mgțkg-1，故L=KM=5/10=0.5EUțml-1。 2.2 样品最大有效稀释倍数的确定市售TAL常用灵敏度(λ)在0.5 EUțml-1,0.03 EUțml-1范围内，根据MVD=λ/L得MVD0.5为1倍，MVD0.25为2倍，MVD0.03为16.7倍。 2.3 TAL灵敏度复核实验按《中国药典》2005年版?部附录操作，对标示灵敏度为0.25 EUțml-1 的两批TAL进行复核。结果见1。 表1 TAL灵敏度复核结果(略) 表1结果表明，两批TAL灵敏度复核结果λc均在0.5,2.0 λ(即0.5,0.5 EUțml-1)间，符合规定，可用于实验。