色谱柱的再生

色谱柱再生第一步：检测色谱柱用10%乙腈水，1.0mL/min的流量冲洗色谱柱，冲洗大约30分钟，将色谱柱中可能存在的磷酸缓冲盐置换掉。然后用85%甲醇流动相，尿嘧啶、硝基苯、萘、芴反相样品评价色谱柱，结果如下：第二步：修补与再生将柱头污染填料挖出，用同样规格的新填料进行修补并更换新筛板，然后用85%的甲醇流动相。在相同条件下进行评价，结果如下图所示，可见虽然色谱柱性能有所改善，但是还需要进行再生处理。对于C18或相应的反相色谱固定相，一般采用洗脱能力比较强的有机溶剂进行再生，图3是用异丙醇溶剂，0.5mL/min流速下，冲洗色谱柱4小时后，换用85%甲醇评价谱图，可见色谱柱性能有比较明显的改善。图4是采用二氯甲烷溶剂，在0.5mL/min流速下又冲洗色谱柱30分钟，然后换用异丙醇冲洗色谱柱2个小时后，换用85％甲醇流动相评价结果，与图3比较可以看出，色谱柱性能又有进一步改善。虽然与新色谱柱出厂指标有一定差距，但是较再生之前有极大差别。