胶乳增强免疫比浊法试剂测定β2-微球蛋白的临床使用评价

标记免疫分析与临床 2007年 6月第 14卷第 2期 胶乳增强免疫比浊法试剂测定 I]}2一微球蛋白的临床使用 黄 志伟，沈均南 ，陈 文 (肇庆市第二人民医院 检验科，广东 肇庆 526000) 临床常用 RIA测定 pz微球蛋 白(pz—MG)含 量，RIA具有准确灵敏，特异性高的特点，但该法需 时长，操作繁琐，有放射污染的缺点。本文用胶乳 增强免疫比浊法测定 pz—MG，并与 RIA进行对 比。 材料与方法 1 材 料 B 一MG胶乳增强免疫比浊法试剂和 p 一MG标 准，由北京科美东雅生物技术有限公司提供。RIA 试剂由上海放射免疫分析技术有限公司提供。混 合血清：取若干个较参考值略高的无溶血、黄疸、脂 浊血清标本进行混合。仪器：CL8000全 自动生化 仪(日本岛津公司)、放免计数仪。 2 实验方法 (1)精密度_1 批内精密度：用比浊法对低、高 两个水平的病人血清随机插入病人标本进行测试， 连续 2O次计算i±S，变异系数Ecv( )]。批 间精密度：用比浊法在 20d内对低、高两个水平的 病人血清进行检测，每天做一次，计算 i±S和 CV ( )。 (2)准确度 混合血清按 20：1比添加标准 (9．8rag／L)混合后进行检测，计算回收率。 表 1 回收系列样品的配制 (3)线性检测 使用 5点标准与浓度为 1．0、 5．0、8．0、10、20mg／L，进行检测，计算检测值与 ，理论值的偏差。 收稿日期：2007—01—23；修回日期：2007—02—06 117 (4)干扰试验 干扰因素主要来 自于溶血、黄 疸和脂浊这 三种 。本文采用 “配对 差异”试 验[3]。 即将干扰物加入标本中，与不加的标本比较。胆红 素干扰采用 4O、8O、160、200、300、384~mol／L浓 度 ；血红蛋白采用 1、3、5．4、7．9、12、15g／L~脂浊采 用 2．5、5．2、8．0、12．0、16．5、23．1mmol／L的甘油 三酯。检测干扰物加入前后对检测结果的影响。 (5)对比试验 每天抽取 33份病人血清标本， 同时用比浊法及 RIA两种试剂在两个检测系统， 连续做 3d检测 ，两种方法检测时均要求做好维护 及校准 ，对结果进行统计。 结 果 (1)精密度实验，见表 2。 表 2 重复性检测结果 (2)准确度，见表 3。 表 3 回收实验结果计算(mg／L) (3)线性结果 本法 J3 一MG 的线性 浓度范 围 为 0～20mg／L。 (4)干扰试验 加入胆红素在 4O～384#mol／L 浓度时 J3 一MG浓度与原血清比较分别为 96．8 、 94．5 、93．6 、95．2 、93．0％和 98．0 ；加入血 红蛋白在 1．0～15g／L时 J3 一MG浓度与原血清比 维普资讯 http://www.cqvip.com 118 较分别 为 95．4％、94．3 、96％、92 、95．6％和 96 ；脂浊在 2．5～23．1mmol／L时 B2一MG浓度与 原血 清 比较 分 别 为 96．2 、95．3 、97．3 、 95．3 、96．2 和 96．8％。 (5)对比实验 本法与 RIA对比结果见图。 图 1 乳胶免疫比浊法与 RIA法对比 对 90例 172-MG 浓度从 0．56～12．06的随机 病人标本同时用比浊法与 RIA进行检测。其回归 直线方程为 ：y(RIA)一0．974X(比浊法)+0．059， r=0．9975，其结果显示两种方法存在 良好的相关 性，两法无显著性差异(P>0．05)。 讨 论 B 一MG是 60年代后期瑞典学者 Barygard等 首先从 wi1son病和慢性镉中毒患者尿中分离和纯 化出来的。是体内有核细胞产生的一种低分子量 蛋 白质 ，(分子 量 为 11．8kD)，位 于 细胞 表 面 ，由 100个氨基酸组成，25位与 81位 的两个氨基酸 由 二硫键联结，它与免疫球蛋白稳定区的结构相似。 从结构来看与组织相容性抗原(HLA)的亚单位是 Labeled~[mmunoassays＆ Clin Med，Jun．2007，Vo1．14，No．2 同～物质，其功能与 HLA有关，是一种与免疫机 制有关的蛋 白质l_4 目前测定 G 一MG有 RIA，EIA，荧光免疫分析 法，免疫散射比浊法等。本文胶乳增强免疫比浊法 完成一个项 目检测所涉及的仪器 、试剂 、校准品、操 作程序、质量控制中的组合，称为检测系统 ]。 本文将岛津 CL8000全 自动生化仪、72-MG胶 乳增强免疫比浊法试剂，配套标准品，组成一个新 的检测 B 一MG的检测系统。为了评价该系统对 B -MG的测定效果，做了重复性试验、准确度试验、 干扰试验、以及与 RIA对比试验。 胶乳增强免疫比浊法测定原理是 B 一MG与包 被在胶乳颗粒上的抗人 B -MG抗体产生浊度，其 浊度与 B。一MG浓度成正比。该法在 CL8000上显 示有高度的精密度 ，良好准确度，较宽线性范围，和 出色 的稳定性，与 RIA相比具有 良好相关性 ，在抗 干扰方面也有良好操作性能，可见本法完全可符合 临床检验使用的要求。 参 考文献 ： [1]冯仁丰．1临床检验质量管理技术基础[M]．上海；上海科学技术 出版社 ，2003：32—35． [2]李萍．生物化学检验[M]．第 2版．北京 ：人 民卫生出版社， 2O03：27-28． [3]冯仁丰．1临床检验质量管理技术基础I-M]．上海：上海科学技术 出版社 ，2003：99． E4]万桂香，李红梅，8z微球蛋白及其l临床价值[J]．中华医学写作 杂 志，2005，12(I2)：1060—1061． [5]冯仁丰．1临床检验质量管理技术基础[M]．上海：上海科学技术 出版社 ，2003：5． (李 宁、陈泮藻编辑) (上接第 120页) 采用鲫Sr一鲫Y敷贴器对跖疣、镶嵌疣进行局部 照射治疗，操作简便，疗效可靠，治愈率高，愈后不 留瘢痕，复发率低，值得临床推广使用。 参考文献 ： [13张奇亮．敷贴治疗核医学[M]．济南：济南科学技术出版社， 2004：24—25． [2]杨国亮，王侠生．现代皮肤病学[M]．上海 ：上海医科大学出版 社 ，1998：304—306． [3]卢倜章，秦明秀．放射性核素治疗学[M]．天津：天津科学技术 出版社 ，1994：214—21 5． (陈泮藻编辑) 维普资讯 http://www.cqvip.com