金黄色葡萄球菌食物中毒调查报告

pEGFP-C1和pEGFP-N1的比较 ,. PEGFP-C1的载体是Kan 原核筛选标记与neo真核筛选标记，这个是没有问题的，如果别人说是Amp抗性，最可能的原因是别人可能将GFP基因连载了另一个载体上，比如pcDNA3.1,形成新的pcDNA3.1-GFP-目的基因达载体，如果是这样的话，那么就变成了 Amp抗性(这是有可能的，因为有些实验觉得用pcDNA3.1的载体表达情况会更好(未经科学证实) ,.pEGFP-C1, PEGFP-N1两个载体都是可以用来表达融合荧光蛋白的目的蛋白载体，只是pEGFP-C1 载体的多克隆位点在GFP荧光蛋白基因之后，所以构建的融合蛋白，目的蛋白的N端连有GFP蛋白，而pEGFP-N1的载体多克隆位点在GFP荧光蛋白基因之前，所 以构建的融合蛋白，目的蛋白的C端连有GFP蛋白. ,.在用pEGFP-C1 构建荧光蛋白融合表达载体时，目的基因直接连在多克隆位点后，很方便，而在用pEGFP-N1 构建荧光蛋白融合表 达载体时,需要把目的基因后的终止密码子去掉或突变掉( ,.为什么要两个不同端的载体能,这是因为有些蛋白连在N端和C端并不一样，虽然都能起标记目的蛋白的作用，但有些蛋白如果其N端连接GFP可能会改变其生物功能或细胞定位，或者有些蛋白其C端连接GFP可能会改变其生物功能或细胞定位，特别是在做 FRET实验的时候，这点就非常重要了(