海藻多糖的提取和抗I型单纯疮疹病毒研究

海藻多糖的提取和抗I型单纯疮疹病毒研究 九一年三月《天然产物研究与开发}V91.3No.J 海藻多糖的提取和抗I型单纯疱疹病毒研究 魏永成罗福成刘惠德赖理任维朴 (中国科学院成都有机化学研究所成都610015) 郑民实李文 (江西医学院微生物学教研室江西330008) 摘要马尾藻经热水提取,乙醇沉淀.得到褐色粗多精.经作抗I型单纯疤客病毒控测 萋漳錾楚纽临床试验治疗单纯瘪疹角膜炎的有效率为84.7%.一一.’_,…,一 关键衙马尾藻.多糖.I型单窟毒 单纯疱疹病毒性角膜炎是一种常见的 传染性眼病,病毒可终身潜伏易反复发作 或致富.近年来,致病人数日益增多,约 病,甲状艨睇普功效=!L...眉内外学者 对其有效化学成份的提取,分离,组成结 构,生物活等行了大量研究”,-Tl. 本文报导了海藻多糖的提般襁_抗I煎单纯 疱疹病毒的研究. 材料和方法 一 ,材料 1.海藻取自广东汕头,经中国科 学院南海海洋研究所鉴定为;--. (1)亭氏马尾藻Sargassu~_hens— lowianumC.Ag (2)瓦氏马尾藻Sargas~umVac- hellianumGrey 旺稿日期{9口年1i月15日 国家自热科学垂奎赞助项B --通讯联善 (3)半叶马尾藻Sargassumhemi- phyllum(Tute)C.Ag 2.原代人胚肌皮单层细胞取人工 流产术后胎儿的肌肉和皮肤,经消化,加 ,入生长波(台IO小牛血清),37?孵育 4—5天. 3.病毒抹I型单纯疱疹病毒取自 中国药品生物制品检验所 : .仪器试剂 垒自动高速冷冻离心机GL一20谰西 仪器仪表总厂} 离心沉淀机LXJ—I型上海医甩分 析仪器厂’ 渗析管{ 95%乙醇,化学纯,成都化学试钠厂 二,海蔫多糖的分离提取 按文献[6]工艺及改良工艺分离提取 得五个样品H,制造方法为粗选藻体 . 后将海藻粉碎,加水煮沸过滤,滤液在常 压下浓缩,乙醇沉淀离心(4000r,p,m). Vo1.3No.1 _———_-—.-———一——…,一一’———一一 祝腚物经无水乙醇,乙醚洗涤后真空干燥 褥海藻多糖H.H系H经脱色处理所 得.脱色方法为将样品配成5的水溶液,’. 调节pH为8—9,『I.文献[酋] 方法测定其总糖含量为lO左右. 四,抗HSV—I试验 将海藻多糖供试前用无离子水配成 255Ct0’l1?02800-tsoo~,10000~g/ml 的10倍浓缩量,节pH为7?0,煮沸 j毒3o分钝后置于一40?保存备用.按 支藏[9]方|祛先散药物对瓤胞无毒界限检 盘,然后作同时,治疗,预防,管外四种 赞药途径试验及临床试验. . 结暴与试论 一 ,海藻多糖的制备条件 按不商制备条件得到H一五个样品, 经作抗HSV—I的药效l定(定性定量 试验),结果见表1. 定性试验t十出现细胞病变,无效(不进 行定量试验) 一 未出现细胞病变,有效(进 行定量试验) 完量试验t使用抑制病毒对数测定 袭T不同制备条件群品的抗_ HSV—I的效果 制备条件抗HSV-I试验’ 嚣学减压透析f脱色一1000100浓缩分离.处理业垦 定性j定量定性窿重———r Hl否否否一,I4.12一3.1 Hi否否是二2.9———————— HI是古是3.1: H?是是一13.242.2 l—————, H-是是是一l3.58+ ‘璃效剥定 从表l中看出不经减压浓缩,透析和 脱色处理的H抗HSV—I的对数大予H一 H.减少以上处理过程可以节约原材料 和能源,.有科于降低制备成本.. =,海藻多糖不同蛤萄途径和剂量抗 HSV-I试验 用海藻多糖H进行了不同给药逮径 和帮盈抗HsV—I试验,结象见表2. 从结果可见同时,治疗,管外给药途 径的最低有效剂量分别为<25.g/ml(抑 病毒对数为2.45),<jOg/mI(2.5O], <100t*g/m!(2.25),着按6种巧同剂量 (25,50,]0o,250,500,IO0Os/mi> 的平均对数值来初步4种绐药途径的 疗效时,同时给药途径(3.86)优于治疗 给药途径(3.29),治疗给药途径优于管 外给药途径(2.37),管外黯药途径忧予 预防造径(O.2). 放效效效 无低中高 ??? 一 ,一,一 ,OO000OO0一扎虬 > VoT.3No.1 表2不舄给药途径和帮量的海藻攫取物对抗I型单纯疱疹病毒的抑 翻对数x?sD 紫药药物莉量(.’g/m1) 违径2550l00250{S0.to.0 ——一一L—————., 同时2.45士0.19I3.28?0.283.90士O.344.1O?0.29毒.55士 0.3I{.87?0.22 袍疗1.78?0.Il2.50?0.163.i5?0.253.54+O.2”1I4.26-I-o.38{.5{?o.30 …一’’., 预防000.65?0.681-?士0?15Ij-27?oo09i.4i?o.13 —— 3.oo+0. 25l3.s8~0.273.80士0.21管外o1.75士o.2i2.25士o.20 三,海藻多糖的临床试验 煽1海藻萝糖H治疗单纯疱疹病毒 性角膜炎]24例,结果见裘3. 衰3海藻多糖治疗单纯疱疹病毒角 跌炎疗效 治愈t溃疡愈台,FL(一),角膜内 层皱折,实质层浸凋水肿消失,食磬葡萄 慕裳者积浓因蓐泄失KP薄_本消失. 好转;溃疡部分愈合,积浓消失,嫡 灶缩小FL范围减小,浸润,水肿,皱 折,KP减短或减少. 不敢:各种病状改变不明显或加重. 参考文献 r1]郑民实等,实用眼科杂志6(1988) 5.270—27l [2]张尔贤等,汕头大学(自然科 ),1(1986),1,15—21. [3]中药大辞典,3978海藻. [4]囤外药讯,4(1989). [5]范罡芳等,中西药科大学,l9 28l. (1988),4,279— [6]H.Ito,cta1.Chem.Pham. BHI{,24(1976),5,1t14. [7]JohnN.C,wbielal,Cwt’- behydrateResearch,140(198, 336—341. [8]黄伟坤等,食品检验与分析,轻工 业出版社,198.9,P32—34. [9]郑民实等,药学通报,16(198]), 388. 嘲 芜一致一0誊 蔓观蔓强 总嘴 Yoi,3N?.l67 STUDYONEXTRACTr()NOFSARGASSUM POLYSACCHARIDEANDTYPEIANTIVIRUSOF HERPESSIMPLEX WeiYongchen8,LuoFucheng,LtuHuide,LaiLi,RenWeipu <ChengduinstitUteo/OrganicChemistry,AcademiaSinioa Chengdu010015) ZhengMinsh~,LiWen (7’口.chingandRes口.rchSestiono,Microbiology.,iangxi Co~llegeo,Medicinjiangxi330008) Abstract. AetudepolysecCharidehasbeenobtainediromSazgassumbyextrac— lionwithhotwaterandp~eciPirationwithalcoho1.Thepolysaceharide i8higheffecttotyPeIanti—virusofherpessimplex.Theeffectiverate fcuringkeratit曲fherpessimplexvirusi目84.7%. Kfey,门?Sa~aasum.Polys~~eharldeypepevit?伯鲁of蝻f娜simplex.