产前筛查产前筛查
孕妇抗体IgG筛查操作程序
一、 中和血清配制:
100ul孕妇血清,100ul二巯基乙醇(2-Me),于37?水育箱孵育30分钟;以充分破坏血清中的IgM类抗体。
二、 血型:
取孕妇、丈夫红细胞,定ABO、Rh系统的血型;
三、 孕妇IgG抗体滴度检测:
效价 1:32 1:64 1:128 1:256
中和血清(ul) 10 200 200 200
生理盐水(ul) 310 200 200 200
1、排4个小试管;
2、第1管: 310ul生理盐水+10ul中和血清;
3、第2-4管:...
产前筛查
孕妇抗体IgG筛查操作程序
一、 中和血清配制:
100ul孕妇血清,100ul二巯基乙醇(2-Me),于37?水育箱孵育30分钟;以充分破坏血清中的IgM类抗体。
二、 血型:
取孕妇、丈夫红细胞,定ABO、Rh系统的血型;
三、 孕妇IgG抗体滴度检测:
效价 1:32 1:64 1:128 1:256
中和血清(ul) 10 200 200 200
生理盐水(ul) 310 200 200 200
1、排4个小试管;
2、第1管: 310ul生理盐水+10ul中和血清;
3、第2-4管:分别加入200ul生理盐水;
4、从第1管吸出200ul加入第2管,混匀,再从第2管吸出200ul加入第3
管,依次倍比稀释(稀释倍数为1:32,1:64,1:128、1:256); 5、于多特异性卡中加入1,丈夫红细胞悬液或丈夫同型同浓度标准红细胞
40ul,再分别加40ul上述1-4管稀释中和血清(一般采取1:32,1:64,1:
128稀释浓度),37?孵育10min;
6、专用离心机离心5min;
7、结果按出现1+的前一管的滴度报告。
四、 孕妇抗体筛查试验
1、同张多特异性卡;
2、4.5.6孔中分别加入1% I、II、III号筛查细胞40ul,再加入40ul孕妇的血清/血浆;
3、多特异性卡放入孵育器37?孵育10min;
4、多特异性卡放入离心机离心5min;
5、判读结果.
- 100%的红细胞沉在微管的底部
+/- 100%的红细胞沉在微管的下端1/3之内 1+ 80%的红细胞沉在微管的下端2/3之内 2+ 80%的红细胞沉在微管的上端2/3之内 3+ 80%的红细胞沉在微管的上端1/3之内 4+ 凝集的细胞全部处于微管的顶部
d.p. 双群
Hemo. 溶血
备注:
1、父亲为A型测抗-A;B型测抗-B;AB型测抗-A和抗-B。 2、筛查细胞,如有凝集,
是ABO系以外的抗体,需作抗体鉴定。
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