[word doc]新生儿血培养出凝固酶阴性葡萄球菌的分析

[word doc]新生儿血培养出凝固酶阴性葡萄球菌的 新生儿血培养出凝固酶阴性葡萄球菌的分 析 中国实验诊断学2010年9月第14卷第9期 文章编号:1007—4287(2010)09—1451—03 — 1451一 新生儿血培养出凝固酶阴性葡萄球菌的分析 李天娇,钟海英,郭红荔,黄涛 (海南省人民医院检验科,海南海151570311) 新生儿血培养中分离出凝固酶阴性的葡萄球菌 (cNs)一直都占居新生儿血培养分离菌的第一位, 但由于CNS是人皮肤正常菌群,在临床新生儿采血 过程中由于操作时间延长或是消毒不充分以及采用 使用各种侵入性医疗器械时都会造成污染,因此导 致血培养中分离出的CNS常见是污染菌,但又由于 CNS可以产生毒力因子而具有严重的致病性,并且 随着CNS耐药性的不断增加,对于抵抗力弱的新生 儿群体,它的致病性更显突出.因此,在临床工作中 新生儿血培养中分离出CNS是污染菌还是病原菌 一 直困扰着很多临床医生和实验室工作者;根据菌 血症病原菌的实验室包括血培养在入院后48 小时内阳性和多次血培养为同一细菌判断为病原 菌,3天以上阳性的CNS,或培养出多种皮肤寄居 菌,或血培养虽多次呈阳性,但属不同种的CNS或 其他细菌等提示为污染_l?2].我们综合文献推荐的 标准,制定出一套实验室评估标准,并对血培养分离 出CNS以评估为病原菌或是污染菌; 1对象与 1.1对象选择我2007年1月到2009年12月我 实验室新生儿科血培养样品1789份,并对分离出 113株CNS作为研究对象. 1.2采血方法在患儿住院抗感染药物使用前或 非感染性疾病患儿在住院过程中怀疑感染时进行血 培养,对患儿进行局部消毒后在无菌操作下经桡动 脉或股静脉取血2—5ml加入Bact/Alert120仪器配 套的需氧血瓶中半小时内送检实验室O 1.3仪器Bact/Alert.120全自动光电比色微生物 仪.其特点为检测微生物浓度所致的酸碱度变 化,该变化反映在瓶底的感光板上,进而被瓶外的光 束捕获,通过电脑的连续监测,分析判定,随时报警. 1.4鉴定实验采用法国梅里埃(VETIK一32)进行 鉴定.对阳性培养瓶及时取样作革兰染色涂片及分 离培养.分离培养后对镜检呈葡萄状排列的革兰阳 性球菌的菌落进行血浆凝固酶阴性初步鉴定,继之 采用法国梅里埃VETIK.32系统作进一步鉴定. 1.5质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923,购自 “卫生部临床检验中心”. 1.6血培养分离出CNS如何区分病原菌或是污染菌 1.6.1血培养分离出CNS实验室评估标准(图1) 1.6.2菌血症临床评判标准[,J 菌血症临床标准应当符合以下至少一项条件: 初次血培养阳性标本采集的当日体温?38~C,脓毒 性休,白细胞升高或核左移,具有弥散性血管内凝血 病变;具有由皮肤菌群引起感染的危险因素如长期 静脉插管或异体移植物;抗生素(包括万古霉素或菌 株敏感的抗生素)治疗有效,或拔除导管或异物,感 染得到控制.实验室标准也应符合以下至少一项条 件:从其他感染部位或导管尖端分离到相同的病原 菌,且耐药谱也相同;多次血培养为同一种细菌. 污染菌的临床标准应符合以下至少一项条件: 无明显发热及危险因素(如免疫功能低下或侵袭性 操作);虽有上述危险因素但随后多次血培养证明为 其他病原菌;使用敏感抗生素治疗无效;发热可由其 他原因解释,且元明显的感染征象.同时还应当结 合实验室的标准,如长时问培养后阳性;连续多次多 日培养,仅1次为CNS;1次血培养分离出2种以上 „ ? 的皮肤菌群;收集CNS阳性标本的72h内又分离出 另1种细菌或真菌,却没有再分离到CNS. 1.6.3结合临床症状和实验室数据,最终评估出分 离出的CNS是病原菌还是污染菌. 1.7统计处理使用Bact/Alert分析软件对每例的 血培养次数,阳性次数,检出时间等进行统计. 2结果 2.1一般资料2007年1月到2009年12月共收到 新生儿科血培养1789份血标本,分离出143例菌 株,其中G一杆菌14例占9.8%;G+葡萄球菌120 例占83.9%,其中CNS113例占79.0%(污染菌89 占78.8%,病原菌24占21.2%),金黄色葡萄球菌7 例占4.9%;真菌5例占3.5%;其它细菌4例占 2.8%. 2.2实验室数据Bact/Alert分析软件分析血培养 ?---—— 1452?---—— 分离出CNS113例;24小时内仪器报警为22例(占 19.5%)25—48小时报警24例(占21.2%),49—168 小时报警分离出67例(占59.3%),经分析24h内 60 50 赣40 娄30 20 1o 分离出CNS 48h4,时是收到第2瓶 收到 ChinJLabDia鼬,September,2010,Vol14,No.9 报警有8例(36.3%)为污染菌,25—48h报警有14 例(58.3%)为污染菌,48h以后全为污染菌.见图 2; 生长菌是否同一种菌,没生长l可能是污染菌 病原菌 是同一种菌 有临床支持 有 图1血培养分离出CNS实验室评估标准 <24h25—48h49.72h73—96h97—120h121-168h 时间(h) 图2血培养中病原菌及污染菌的检出时间比较 2.3根据CNS实验室评估113例CNS中24株为病 原菌占分离CNS的21.2%,血样本污染89例 78.8%,与文献[3,4,5]70—90%之间报导相符,除 去被污染分离出的CNS,新生儿科致病性CNS占总 菌血症病原菌44.4%(24/54)为感染病原菌的首位. 3讨论 近年来随着抗生素的广泛应用,新生儿病原菌 种类也发生了变迁,国内外资料显示新生儿CNS感 染呈增多趋势,2003年西班牙学者进行一项对新生 儿病房感染的前瞻性研究发现,革兰阳性菌占首位 (76.4%),CNS占其中的72.5%,居新生儿细菌感染 的第一位?6;汪复等人研究的新生儿CNS感染也居 新生儿细菌感染的首位_7j,本组数据新生儿科血培 评估内容 ?血培养阳性报警 时间:<48h ?与临床医生沟通 病史:是否有败血 症临床支持 ?实验室数据: WBCl,NT,有核左移 现象或细胞内有中毒颗 粒及空泡 污染菌 养除去分离出的污染菌,CNS引起的败血症为24 例,占总的血培养分离出的病原菌的44.4%(24/54) 位于新生儿菌血症的第1位,与文献相符. 新生儿败血症是威胁新生儿生命的危重疾病, 尤其在低体重儿,早产儿较易感染,是新生儿死亡的 重要疾病,而血培养分离出病原菌是新生儿败血症 诊断和治疗的主要依据.但在血培养中却经常因各 种原因造成血样本的污染,因此在血培养中如果分 离出CNS,那么如何辨别是病原菌还是污染菌尤其 重要,需结合临床症状和实验室信息来综合分析,如 果仅依靠实验室的数据来判定,就出现误报的现象. 例如,实验室确定菌血症的标准为阳性报警时间在 48h以内和多个血培养瓶阳性,而本研究结果显示 虽然病原菌阳性报警时问短于污染菌,但48h以内 血培养CNS仍有36.3—58.3%为污染菌,因此CNS 菌血症应当依据临床症状,实验室数据和微生物学 三方面的资料来判定. 总之,CNS在新生儿菌血症中感染率高,而在血 培养时血样本污染率也高,因此应减少操作时造成血 培养瓶污染,实验室应提高判断血培养中分离出的 CNS是病原菌还是污染菌的能力,这对于给临床提供 准确有意义的血培养报告单有着至关重要的意义. 中国实验诊断学2010年9月第14卷第9期 参考文献: [1]ChandasekarPH,BrownWJ.Clinicalissuesofbloodeultur~[J].Arch IntermMed,1994,154(4):841. [2]KhatibR,RiedererKM,ClarkJC,ata1.Coagulase—negativestaphylococ ci inmultiplebloodcultures:strainrelatednessanddeterminantsofsalne— strainbacteremia[J].JClinMierobiol,1995,33(4):816. 13JHerwaldtLA,GeissM,KaoC,ata1.Thepositivepredictivevalueofiso— laingeoasulase—negativestaphylococcifrombloodcultures[J].ClinInfect Dis,1996.22(1):14. [4]RingbergH,ThorenA,BredbergA.Evaluationofc0agulase—neg~ve 文章编号:1007—4287(2010)09—1453—03 ?--—— 1453---——— staphylococciinbloodcultures:aProspectiveclinicalandmicrobiological study[J].ScandJInfectDis,1991,23(3):315. 15JSouvenirD,AndersonDEJr,PalpantS,eta1.Bloodculturespositivefor eoagulase-negativestaphylococci:antisepsis,pseudobactermia,andtherap y ofpatients[J].JClinMicrobiol,1998,36(7):1923. [6]UrreaM,InondoM,ThioM,eta1.Aprospectiveincidencestudyofnoso— eomialinfectionsinneonatalcareunitlJJ.AmJInfactControl,2O03,31 (8):505. [7]汪复.,?b3D细菌耐药性及防治对策[J].中国实用儿科杂志, . 7.,002,17(3):129. (收稿日期:2010—02—14) MMP一9,TIMP一1及hs—CRP与急性冠状动脉综合征 的临床相关性研究 李子文,李梦瑶,梁玉兰,王文英 (滨卅I市中心医院,山东惠民251700) 急性冠脉综合征(ACS)包括不稳定:绞痛 (UAP),ST段抬高型和非段抬高型心肌梗塞 (MI),发病机制为冠状动脉粥样硬化易损斑块破裂 及血栓形成,而炎症是导致冠脉易损斑块的形成和 不稳定以及闭塞性血栓的重要原因.基质金属蛋白 酶(Matrixmetalloproteinases.MMPs)降解细胞外基质, 是斑块破裂的核心因素.MMPs组织抑制因子(tis— sueinhibitorsofmatrixmetalloproteinases,TIMPs)是 MMPs特异性抑制物,两者存在动态平衡,一旦失衡 即MMPs活性增高,加速斑块破裂…1.高灵敏度C 反应蛋白(hs—CRP)能敏感地反映系统或局部炎症反 应,与冠脉疾病的发病率间存在显着的线形正相关 关系[21. 他汀类药物显着降低急性冠脉综合征的发病 率,病死率,其中抗炎作用尤其受到重视.本研究在 ACS患者中早期短疗程使用氟伐他汀,观察MMP一9, TIMP.1,hs.CRP水平在用药前后的变化,以探讨ACS 发生机制与炎症的关系,评价氟伐他汀对ACS早期 的治疗效果及阐明其作用机理. 1资料与方法 1.1对象 按2007年修订的急性冠脉综合征指南,随机人 选我院2008年6月一2009年10月间ACS患者81 例,其中UAP47例(男性31例,女性16例,平均年龄 58?10.3岁),急性心肌梗塞34例(男性22例,女性 12例,平均年龄60?9.7岁);入选稳定性心绞痛 (SAP)24例(男性16例,女性8例,平均年龄57? 10.4岁),健康对照20例(男性12例,女性8例,平 均年龄57?8.8岁),将ACS患者随机分成氟伐他汀 治疗组(41例)及常规治疗组(40例). 排除标准:AMI,UAP,SAP及Control组均剔除可 引起研究指标变化的其他疾病者,接受抗炎治疗,一 月内使用过他汀类药物的患者也不入选. 1.2方法 (1)标本采集:健康对照组采集一次空腹静脉血 6ml,ACS及SAP患者均于发病后12—24小时内及 ACS患者治疗5天后采集空腹静脉血6ml,血清置 一 70?冰箱保存待测. (2)检测方法 ?hs.CRP的测定:采用瑞士Roche公司生产的 免疫比浊法试剂盒,按说明在日本OlympusAu640全 自动生化分析仪测定. ?血清MMP.9,TIMP一1浓度水平测定:试剂 盒由美国M&I公司生产,采用定量ELISA法,按试 剂说明书操作. 1.3统计学处理 采用SPSS11.0软件包进行统计分析.计量资 料结果以均数?标准差(?s)示,组问计量资料