RPHPLC法测定轻身消胖丸中盐酸麻黄碱的含量

RPHPLC法测定轻身消胖丸中盐酸麻黄碱的含量 DOC格式,方便您的复制修改删减 RPHPLC法测定轻身消胖丸中盐酸麻 黄碱的含量 (作者:___________单位: ___________邮编: ___________) 【摘要】 目的 建立轻身消胖丸中盐酸麻黄碱的定量方法。 方法 采用RPHPLC法,色谱柱,Waters XTerra C18(4.6 mm × 250 mm,5 μm)不锈钢柱,流动相:1%磷酸溶液(含0.4%三乙胺)乙 腈(体积比91?9),流速,1.0 mL/min,检测波长,207 nm,柱温, 35 ?。结果 盐酸麻黄碱的进样量在16.6,166 μg/mL范围内与峰 面积呈良好线性关系,盐酸麻黄碱的平均回收率为98.40%(n=6), RSD为1.2%。结论 方法简单快速、专属性强、重复性好、精密度 高,可用于控制该制剂的质量。 【关键词】 轻身消胖丸; 盐酸麻黄碱 ; RPHPLC; 含量测定 Abstract:Objective To establish an HPLC method for content detection of ephedrine hydrochloride in Qingshenxiaopang pills. Methods The sample was analyzed on a Waters XTerra C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm) column using 1%H3PO4,0.4% triethylamine, acetonirile(91?9) as mobile phase. The detection wavelength DOC格式论文,方便您的复制修改删减 was at 207 nm. Results The average recovery of the method was 98.4 % with RSD 1.2%. The linear range of phedrine hydrochloride was 16.6~166 μg/mL. Conclusion This method is simple, quick, reproducible and suitable for the quality control of Qingshenxiaopang pills. Key words:Qingshenxiaopang pills; ephedrine hydrochloride; RPHPLC 轻身消胖丸为中药复方制剂,由罗布麻叶、麻黄、山楂等19 味药材研制而成。通过益气、降脂综合调整机体功能而达到减肥目的, 使机体新陈代谢恢复正常平衡状态,轻松减肥。为了较全面控制制剂 质量,本文以方中佐药麻黄中的麻黄碱为定量指标。因本品药味多, 成分复杂,干扰严重,若按文献报道的HPLC方法,1,3,,提取和 测定盐酸麻黄碱成分不理想。对样品处理方法考察,经色谱条件优化, 本实验建立HPLC 法测定了该制剂中盐酸麻黄碱。该方法专属性强, 灵敏度高,重复性好,可作为本品质量控制指标。 1 仪器与试药 Waters2695/2996,PDA二极管阵列检测器,Empower色谱 工作站,盐酸麻黄碱对照品,批号,171241-200404,购自中国药品 生物制品检定所,轻身消胖丸(广州王老吉药业有限公司,批 号:20061206,20061210,20061212),乙腈为色谱纯,其余试剂均为 分析纯。 2 方法与结果 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 2.1 色谱条件色谱柱,Waters XTerra C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),1%磷酸溶液(含0.4% 三乙胺)乙腈(体积比91?9),流速,1.0 mL/ min,检测波长,207 nm,柱温,35 ?。 2.2 溶液的制备 2.2.1 对照品溶液的制备精密称取盐酸麻黄碱对照品适量,加水制成含盐酸麻黄碱0.3320 mg/mL。 2.2.2 供试品溶液的制备精密称取本品10 g,加水60 mL使溶解,加氨水7.5 mL,摇匀,用三氯甲烷充分振摇萃取5次,每次20 mL,合并三氯甲烷液置于圆底烧瓶中,室温减压旋转至干,4,,加流动相溶解并定容至10 mL,密塞,超声使其溶解,0.45 μm滤膜滤过,即得。 2.2.3 阴性样品溶液除不含麻黄外,其余按处方比例制备缺麻黄的样品,按“2.2.2”项下方法制备阴性样品溶液。 2.2.4 药材对照液取麻黄药材按“2.2.2”项下方法制备,作为药材对照液。 2.3 线性关系精密称取盐酸麻黄碱16.60 mg,至50 mL量瓶中,加流动相溶解至刻度,摇匀,得约0.332 0 mg/mL盐酸麻黄碱对照品储备液。精密吸取上述对照品储备液1、2、4、6、8、10 mL分别置20 mL量瓶中,并用流动相稀释至刻度,混匀后,分别进样10 μL,记录色谱图。以色谱峰面积(A)为纵坐标,对照品质量浓度,ρ,为横坐标,进行线性回归,回归方程为A=21 523ρ+21 310,r=0.999 7,盐酸麻黄碱在166,166 μg/mL范围内呈良好线性。 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 2.4 阴性试验按上述色谱条件,分别取对照品溶液、供试品溶液、药材对照液和阴性样品溶液各20 μL,分别注入高效液相色谱仪,结果供试品色谱中,盐酸麻黄碱与其他色谱峰分离较好,阴性样品溶液在盐酸麻黄碱的保留时间范围内无干扰峰出现,而麻黄药材和轻身消胖丸样品中均含有盐酸麻黄碱峰,说明盐酸麻黄碱来源于麻黄药材中。见图1。 A.盐酸麻黄碱对照品; B.麻黄阴性空白; C.轻身消胖丸供试品; D.麻黄药材 图1 轻身消胖丸的HPLC色谱图,略, Fig.1 Chromatograms of Qingshenxiaopang pills 2.5 精密度试验 取供试品(批号20061212,溶液,重复进样6次,每次20 μL,测定峰面积值分别为1 451 487、1 443 701、1 440 687、1 468 314、1 468 913,1 454 920,结果RSD为0.83%。 2.6 重复性试验取同一批样品,批号20061206,,按“2.2.2”项下方法配制6份供试品溶液,分别测定盐酸麻黄碱含量,结果平均含量为33.92 mg/g,其RSD为10%。 2.7 稳定性试验取同一供试品,批号20061206)溶液分别于0、2、4、6、8、12、24 h进样,分别测定麻黄碱的峰面积,结果其RSD为15%。表明供试品溶液在24 h内稳定。 2.8 回收率试验 精密称取10 g已知盐酸麻黄碱含量,33.88 mg/g)的同一批样品6份,精密加入一定量盐酸麻黄碱对照品,按“2.2.2”项下方法制备,测定其含量,并计算回收率,测定结果见表1。 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 2.9 含量测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 μL,注入高效液相色谱仪,以上述色谱条件进行测定,按外标法以峰面积计算样品的含量。共测定3批样品,结果3个批号20061206、20061210、20061212的样品所测得的盐酸麻黄碱含量分别为33.88、33.62、34.17 μg/g。 表1 盐酸麻黄碱的加样回收率试验结果,略, Tab.1 Results of recovery(n=6) 3 讨论 3.1 检测波长的选择取盐酸麻黄碱对照品适量,加流动相溶解后,经200,400 nm紫外扫描,结果表明在207 nm 处有最大吸收,故选择207 nm作为检测波长。 3.2 流动相的选择由于盐酸麻黄碱的碱性基团极易受C18柱的硅胶键合相表面残留的硅醇基极性点的影响,而使峰拖尾。在流动相中加入0.4%三乙胺作扫尾剂,起到抑制和掩蔽固定相表面极性点的作用,使峰形尖锐且对称。 3.3 色谱柱的选择实验中发现色谱柱对盐酸麻黄碱的分离起决定性作用,分别考察了Hypersil ODS C18(4.0 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,Waters Symmetry C18 (4.6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,Waters XTerra C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱。结果Waters XTerra C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱使用的pH范围宽,对盐酸麻黄碱具有柱效高,峰形优异,稳定性好的优点。 3.4 提取方法的选择本文曾采用直接加1%盐酸甲醇超声处理 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 的方法制备样品溶液,5,,但在盐酸麻黄碱峰前后,有干扰峰,不易与盐酸麻黄碱分离。利用麻黄碱能溶于水,加碱后游离的麻黄碱能被三氯甲烷、乙醚等有机溶剂萃取,加酸后成盐复溶于水,4,,样品经碱化萃取后,除去了干扰峰。将轻身消胖丸加水溶解并碱化后,分别用三氯甲烷萃取,三氯甲烷液在下层,处理较方便。对加氨水的量也进行了比较,加7.5 mL氨水,药液pH值已达12,符合碱化的要求。对萃取次数比较的结果显示萃取5次已经提取完全。 【参考文献】 ,1, 毛颐晴,俞小陶.高效液相色谱法测定咳喘宁口服液中麻黄碱的含量,J,.江苏药学与临床研究,2001,9(1),23-24. ,2, 国家药典委员会.中华人民共和国药典,一部,M,.北京,化学工业出版社,2005,224. ,3, 赵大成,曲婷丽.高效液相色谱测定止嗽定喘口服液中盐酸麻黄碱的方法研究,J,.肿瘤研究与临床,2005,17(6),394-396. ,4, 祝璇,黄吉吉裕.HPLC测定咳喘宁口服液中盐酸麻黄碱的含量,J,.中成药,2005,4(27),474-476. ,5, 熊慧林,郑茂鑫.HPLC法测定克咳胶囊中盐酸麻黄 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 碱的含量,J,.中国药事,2006,20(12),749-750