再灌注前后稀释血液对兔缺血再灌注心肌SOD和丙二醛的影响

再灌注前后稀释血液对兔缺血再灌注心肌SOD和丙二醛的影响 Supporting cell s prol if eration of the chick lagena epithel ium in vitro culture T i a n X i uf en De p a rt m en t of O tol a ry n gology , t he Fi rst A f f i l i ated Hos pi t al , Hen a n M edical U ni ve rsi t y , Zhen gz hou 4 500 52 15 Ro man chicks ,aged f ro m 7 to 14 days , were used in t his st udy. The cochlea dissdcted in2 3 tactly were cult ured in vit ro . H2TdR was steadily added to t he cult ure fluid 3 days af ter cult ure , 3 and t he cult ures were ter minated o n t he 3rd day and t he 6t h day af ter using H2TdR ,respectively and t hen t he lagena epit helium at t he distal tip of t he B P was lighted and cut into sectio ns to be o b2 served. The result s showed t hat t here was low level p roliferatio n of suppo rting cells in t he lagena 3 epit helium by mixing H2TdR fo r 3 days and 6 days. The labelled suppo rting cells were mo stly lo2 cated in t he basilar and t he middle layers ,a few cells moved to t he surf ace of t he epit helium. It was co ncluded t hat a co ntinuo us ,low level p roliferatio n of suppo rting cells existed in t he macula of t he lagena at t he distal tip of neo natal chicks , suggeting t hat t he f acto rs of initiating and stimulating p roliferatio n of t he suppo rting cells might exist in t he isolated cochlea epit helium. Key wo rds : suppo rting cell ;p roliferatio n ;lagena epit helium ;chick 再灌注前后稀释血液对兔缺血再灌注心肌 SOD 和丙二 3 醛的影响 )))))))1222222 汤姜文霞吕杰胜鄢文海祁元明黄幼田王柏生宁 ) ) 1河南医科大学药学系 郑州 450052 2河南医科大学病理生理学教研室 郑州 450052 摘要 观察应用右旋糖酐 40 分别于再灌注前后稀释血液对兔缺血再灌注心肌 SOD 活性和丙 ( ) 二醛 MDA含量的影响 。心肌缺血 45 min ,再灌注 180 min ,复制急性心肌缺血再灌注模型 。30 只 () 兔随机分为 3 组 ,每组 10 只 。其中 ?组 对照组、?组于再灌注后 20 min 稀释血液 ; ?组于再灌 ( 注前 20 min 稀释血液 。结果 : 与 ?组相比 , ?组 SOD 活性无明显变化 , MDA 含量明显降低 P < ( ) ) 0105;而 ?组 SOD 活性明显升高及 MDA 含量显著降低 P < 0105。提示 : 再灌注前后稀释血液 对缺血再灌注心肌均有保护作用 ;而且再灌注前稀释血液的效果明显优于再灌注后稀释 。 关键词 缺血再灌注心肌 ;血液稀释 ;血液流变学 ;右旋糖酐 ; SOD ;丙二醛 中图分类号 R363121 1( ) 减少心肌缺血再灌注后氧自由基 O FR伤, 改善缺血。血液稀释能降低血液粘度 的产生 ,保护自由基清除剂的活性如超氧化 心肌的微循环状态及心肌细胞的代谢 , 对单2 ( ) 物歧化酶 SOD, 可减轻心肌缺血再灌注损 纯性心肌缺血疗效甚好, 但该疗法用于防 治心肌缺血再灌注损伤的研究甚少 。作者比 3 河南省自然科学基金资助课题 934022000 较了用右旋糖酐 40 分别于再灌注前 、后稀释 212 兔缺血再灌注心肌组织 MDA 含量变化 血液对兔缺血再灌注心 肌 SOD 和 丙 二 醛 ( ) MDA的影响 ,观察其对再灌注心肌的保护 见表 2 。 作用 。 表 2 兔缺血再灌注- 1 1 材料与方法 μ心肌组织 MDA 含量变化 b/molg? ( 111 材料 健康大耳白兔 由河南医科大学 组别n 非缺血区缺血区 ) 实验动物中心提供30 只 , 雌雄不拘 , 体重 ?组1142 ?0127 143 ?0133 210 210,215 kg 。随机分为 3 组 ,每组 10 只 ,心 3?组 10 1144 ?01351157 ?0119 ?组 3肌缺血 45 min ,再灌注 180 min ,复制兔急性 10 1148 ?01461139 ?0124 ( ) 心肌缺血再灌注模型 。其中 , ?组 对照组注 : 3 与 ?组缺血区比较 P < 0105 未给任何治疗 ; ?组于再灌注后 20 min 从左 股动脉放血 9 ml/ kg ,同时等速等量从左股静 与 ?组比较 , ?、?组动物缺血区心肌 (脉输入右旋糖酐 40 国营天津华津制药厂 ,批 ( ) MDA 含量均明显降低 P < 0105。 ) 号 9311023, 20 min 完成 ; ?组于再灌注前 3 讨论 20 min 按 ?组方法行血液稀释 。 心肌缺血再灌注损伤取决于两方面的作 112 方 法 心肌缺血 45 min , 再灌注 180 用 :一是再灌注前就已经发生的心肌缺血性 min 后 ,将冠脉重新结扎 ,立即取出心脏 ,以阻损伤 ; 二是再灌注时氧自由基的爆发性产 断线为参考点分别称取缺血区与非缺血区心 3 ,4肌 200 mg , 各加入 4 ?预冷的 0116 mol/ L 生 ,结果导致心肌 SOD 活性明显下降 ,大KCl 溶液 2 ml ,制成 100 g/ L 心肌匀浆 。离心 量产生的氧自由基不能被及时清除 , 与细胞后取上清液测定以下指标 : ?心肌 SOD 活 膜性结构发生脂质过氧化反应 , 生成大量 ( ) 性 ,用亚硝酸盐法 N , 测定每 mg 蛋白质所 MDA ,造成心肌细胞损伤 。许多研究表明 ,心 含 SOD 的量 ; ?心肌 MDA 含量 ,用硫代巴比 肌缺血可致血液流变性明显异常 , 再灌后进 妥酸比色法测定每 mg 蛋白质所含 MDA 的 一步加重 , 表现为血浆粘度 、全血粘度升高 。量 ; ?心肌组织蛋白定量用蛋白2染料结合 这是因为 ,氧自由基和 MDA 可使红细胞变形 5 ,6 ( ) 法 。实验数据用 x ?s 表示 ; 比较用两样本 ?性下降 、聚集性增强,心肌缺血可使血浆 7 P < 0105 判断差异 均数 t 检验或 t检′验 ,以 纤维蛋白原含量增加。血液流变性的恶化 有显著性 。 一方面加重缺血心肌微循环障碍 , 使心肌缺 血缺氧进一步加重 ; 另一方面增加外周循环 2 结果 阻力 ,使心肌耗氧量增加 ,从而加重再灌注心 211 兔缺血再灌注心肌组织 SOD 活性变化 肌的损伤 。 见表 1 。本实验中 , ?组动物行血液稀释后可使 缺血区 MDA 含量明显降低 。其可能是 μ 表 1 兔缺血再灌注心肌组织 SOD 活性变化U/ g 由于血液稀释后可使缺血区“血浆”流量明显 组别非缺血区缺血区n 8 增加, 有利于冲走蓄积在心肌组织内的自 ?组68127 ?10124 161 ?9162 3010 由基 、MDA 及其他有害代谢产物 , 改善心肌 ?组 10 70182 ?815134173 ?121803细胞代谢 。本实验还显示 , ?组动物缺血区 71154 ?11148?组 10 52128 ?11179 MDA 含量明显降低和 SOD 活性显著升高 , 注 : 3 与 ?组 、?组缺血区比较 P < 0105 效果明显好于 ?组 。这可能因为一方面再灌 与 ?组相比 , ?组动物缺血区心肌 SOD注前稀释血液不仅可使再灌注后心肌血流量 ( 活性无明显改变 ; ?组则明显高于 ?、?组 P ) < 0105。 ocardial st unning. Annu Rev Physiol ,1992 ,54 :243 及局部代谢环境得以改善 , 也能使缺血时的 Walembe H ,Davies KJ , Chai D ,et al . Alteratio ns of 5 心肌血流量及局部代谢环境得以改善 , 防止 human eryt hrocyte membrane fluidity by o xygen2de2 或缓解了再灌注后血液流变性的进一步恶 rived f ree radicals and calcium. Free Rad Biol Med , 化 ;另一方面血液稀释后心肌耗氧量降低 ,这 1990 ,9 :507 9 些均可使再灌注后氧自由基产生减少, 从 L aco mbe C , L ee AJ , Smit h WC , et al . Co mpetitive 6 而保护缺血再灌注心肌 。 role bet ween fibrinogen and abumin o n t hixot rop y of red cell suspensio ns. Bior heology ,1988 ,25 :349 参 考 文 献7 Ruan HD ,Do ng CR ,Ling H. The effect s of normo2 1 Chen S , Zhu Q ,J u H ,et al . The role of o xygen f ree volumic hemodilutio n wit h Dext ran 40 o n acute my2 radicals in myocardial ischemia/ reperf usio n injury. ocardial ischemia reperf usio n injury in rabbit s. J China Med Sci J ,1991 ,6 :127 To ngji Med U niv ,1992 ,12 :23 2 鄢文海 , 王柏生 , 汤宁 , 等. 等容血液稀释和葡萄 8 Co hn L H , L amberti JJ , Florian A , et al . Effect of 糖2胰岛素2氯化钾溶液对狗急性心肌缺血左室功 hemodilutio n o n acute myocardial ischemia . J Surg ( ) 能的保护作用. 河南医科大学学报 , 1993 , 27 3: Res ,1975 ,18 :523 23 9 Vaca CE , Harms RM . Lipid pero xidatio n in t he rat2 3 Bolli R. Mechanism of myocardial″slunning″. Circu2liver sf ractio n : influence of membrance lipid co m2 9 latio n ,1990 ,82 :723 positio n. Mutatio n Res ,1986 ,162 :21 4 Kusuo ka H , Marban E. Cellular mechanisms of my2 () 1997201222 收稿 责任编辑赵秋民 hemodil ution bef ore and af ter reperf u2 Eff ects of isovol umetric sion on SOD and MDA of ischemic reperf used myocardium in ra bbits 1) 2) 2) 2) 2) J i a n g W en x i a, L u J ies hen g, T a n g N i n g, Y a n W en hai , Q i Y u a n m i n g, H u a n g 2) 2)Y ou t i a n , W a n g B ais hen g ) ) 1 De p a rt m en t of Pha r m acy , Hen a n M edical U ni ve rsi t y , Zhen gz hou 450 05 22De p a rt m en tof Pat hop hysioloy g , Hen a n M edical U ni ve rsi t y , Zhen gz hou 4 500 52 The p urpo se of t he p resent st udy was to investigate t he effect s of hemo dilutio n wit h Dext ro n 40 befo re and af ter reperf usio n o n co ntens of SOD and MDA of ischemic reperf used myocardium. Co ro nary artery was occluded fo r 45 min and t hen reperf used fo r 180 min in o rder to rep ro duce a2 cute myocardial ischemia2reperf usio n mo dels. A total of 30 rabbit s were equally divided at rando m () ( into t hree gro up s : Gro up ? co nt rol, Gro up ? hemo dilutio n was perfo r med 20 min af ter reperf u2 ( ) ) sio n,and Gro up ? hemo dilutio n was perfo r med 20 min befo re reperf usio n. Result s : Co mparedwit h Gro up ?,SOD activities had no o bvio us difference ,and MDA co ntent s decreased significantly ( ) in Gro up ?P < 0 . 05; SOD activities and MDA co ntent s significantly elevated and decreased in ( ) Gro up ?P < 0 . 05, respectively. The result s indicated t hat hemo dilutio n given befo re and af ter reperf usio n co uld p rotect ischemic reperf used myocardium ,and t he effect s of hemo dilutio n adminis2 tered befo re reperf usio n were much bet ter t han af ter reperf usio n . Key wo rds :ischemic keperf used myocardium ; hemo dilutio n ; hemo rr heology ;Dext ran 40 ; SOD ; MDA