项目三:何首乌中二苯乙烯苷的提取
班级: 生物制药092 姓名: 王斌 学号: 20097093213
同组组员: 许天红 胡燕 方聪聪 吴培 胡巨樑 叶筠 胡楚楚 史亦天
郭超云
项目三:何首乌中二苯乙烯苷的醇提工艺 研究目的:
何首乌为蓼科多年生草本植物。自古以来,人们认为何首乌具有益寿延年、延缓衰老之功效,是著名的滋补中药。现代医学表明,何首乌具有增强免疫功能,抗氧化作用,延缓大脑衰老,提高DNA修复功能还具有延长寿命,降低胆固醇,改善脂肪代谢等多项功能。二苯乙烯苷是何首乌中特有的生物活性成分,它具有良好的水溶性、醇溶性同时具有抗氧化清除自由基,降低胆固醇,保肝等多重能, 【6】[1.2.3.4.5]作为抗衰老的组分极具研究的价值。
研究
1、 材料与方法
1(1材料、试剂与仪器
制何首乌产于广东高州以黑豆汁拌制、蒸煮、烘干而成
蒸馏水、60%的乙醇和95%的乙醇、
粉碎机、紫外-可见分光光度计、离心机、回流装置、电子天平、500ml和100ml各2只定容瓶
2、 二苯乙烯苷的测定 [2。7]参照文献测定二苯乙烯苷。将提取液在4000r/20min离心,并在0.1Mpa室温下真空干燥上清液;溶解真空干燥产物,稀释定容,在324nm波长下测定其吸【5】光度值以白藜芦醇苷作对照品标定其二苯乙烯苷的含量,计算提取率。 【5】注:由于实验室没有白藜芦醇苷作对照品,故二苯乙烯苷提取的实验有吸光度代替,吸光率百分率高则二苯乙烯苷提取率高。
3、二苯乙烯苷的质量m(提取液吸光度值的换算值 mg)与(相对应的何首乌原
料质量M mg)
m
二苯乙烯苷提取率(%),——————×100%
M
1
【】74、参考文献记载:
? ? ? ? ? 料液比1:5 1:7 1:9 1:12 1:`15 (g:ml)
二苯乙烯苷5.297 5.399 5.882 5.681 5.720 的率(%)
?温度(?) 30 40 50 60 80 二苯乙烯苷5.590 5.603 5.605 5.617 5.671 的率(%)
?乙醇体积40 50 60 70 80 分数(%)
二苯乙烯苷5.441 5.579 5.896 5.713 5.061 的率(%)
?提取时间20 30 40 60 90 (min)
二苯乙烯苷5.321 5.477 5.604 5.574 5.557 的率(%)
注:参考文献记载上何首乌粉一次用量在20g,而我们选取的何首乌粉是4g
4(1原始
:
原料的制备去药店买制何首乌,粉碎,收集与包装容器内以备用
4(2根据料液比二苯乙烯苷提取
准确称取2份4.0g何首乌粉置于圆底烧瓶内,分别在圆底烧瓶内加入60%的乙醇进行二次回流详细数据如
(1-1):
温度 80?
料液比 1:9 1:12
2
时间 40min
溶剂浓度 60%
1—1
4(2.1在温度为80?、提取时间为40min条件下分别在盛放何首乌粉的2只圆底【7】烧瓶内加入60%36ml、48ml乙醇进行回流提取, 离心,得上清夜待用
4(2.2进行离心后的液体(上清液)用玻璃棒进行引流入2只500ml的定容瓶内,
(帖上标签1:9和1:12);残渣再次放入原地烧瓶内按4.2.1再次进行回流、
离心,再用玻璃棒进行引流入原2只500ml的定容瓶(帖上标签1:9和1:12)
3
内,次序不得搞错。
4.2.3 在2只装有提取液的500ml定容瓶内分别用蒸馏水定容至500ml,取5ml的
ml入100ml的定容瓶内用蒸馏水定容至100ml, 取1ml的移液管移移液管移取5
取1ml移入10ml试管内用95%乙醇定容至10ml,与324nm处测定吸光值,根据标准【7】曲线计算二苯乙烯苷的率。
5、根据温度比二苯乙烯苷提取
4
5.1准确称取2份4.0g花生粉置于锥形瓶内,分别放入圆底烧瓶内加入60%的乙醇进行二次回流详细数据如表格(2-1)
温度 30? 40?
料液比 1:9
时间 40min
溶剂浓度 60%
2-1
5(2 在温度为30?、40?提取时间为40min条件下分别在盛放何首乌粉的2【7】只圆底烧瓶内加入60%36ml、48ml乙醇进行回流提取, 离心,得上清夜待用
5
5(2.1 进行离心后的液体(上清液)用玻璃棒进行引流入2只500ml的定容瓶内,(帖上标签30?和40?);残渣再次放入原地烧瓶内按5.2再次进行回流、离心,再用玻璃棒进行引流入原2只500ml的定容瓶内,次序不得搞错。
5(2.2 在2只装有提取液的500ml定容瓶内分别用蒸馏水定容至500ml,取5ml的移液管取5ml入100ml的定容瓶内用蒸馏水定容至100ml, 取1ml的移液管移取1ml
6
移入10ml试管内用95%乙醇定容至10ml,与324nm处测定吸光值,根据标准曲线计【7】算二苯乙烯苷的率。
6、结果与讨论
通过吸光度的测定来确定不同料液比、不同温度对提取率的影响。 1、料液比对提取率的影响
?随着料液比的越来越多反至提取率越来越低吸收值如表格(3-1)
料液比 1:9 1:12 紫外吸收
值324nm
第一次吸收值 0.103 0.082 第二次吸收值 0.129 0.078 第三次吸收值 0.129 0.079 平均吸收值 ?0.129 ?0.08 提取率(%) 3.23% 2.00%
3-1
?随着温度值越来越高反至提取率越来越低吸收值如表格 (4-1)
温度比 30? 40? 紫外吸收
值324nm
第一次吸收值 0.144 0.143 第二次吸收值 0.143 0.142
7
第三次吸收值 0.142 0.141
平均吸收值 0.143 0.142
提取率(%) 3.58% 3.55%
4-1
:实验结果所示,二苯乙烯苷的最佳提取条件料液比在1:9,温度在30?
在紫外分光光度机吸收值最高
参考文献:
【1】张志国,吕泰省,姚庆强解放军第88医院 药剂科 山东 泰安 271000; º山
东省医学科学院药物研究所 山东 济南 250062
【2】朱仁发,王东,邵国泉合肥学院化学与材料工程系, 安徽合肥230022 【3】戚爱棣天津中医学院中药系, 天津 300193
【4】刘新桥, 高文远,陈海霞天津大学药物科学与技术学院, 天津300072 【5】王春英( 综述) , 张兰桐* ( 审校)河北医科大学药学院药物分析教研室,
河北石家庄050017
【6】李秀琼佛山市中医院药房, 广东佛山528000
【7】吕丽爽 汤 坚江南大学食品学院,无锡,214036
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