83例肾活检标本免疫组化结果分析

83例肾活检标本免疫组化结果 济宁医学院2010年12月第33卷第6期447 doi:10.3969/j.issn.i000—9760.2010.06.027 83例肾活检标本免疫组化结果分析 宪敏徐芳芳魏丽崔文 (济宁医学院附属济宁第一人民医院山东济宁272111) 关键词肾活检;免疫组化;病理诊断 中图分类号:R322.61文献标志码:B文章编号:1000—9760(2010)12—447一Ol 本文对83例肾活检标本的免疫组化结果进行回顾性 分析,探讨免疫组化在基层医院.肾活检病理诊断中的意义. I材料和 材料:收集我院2009年12月25日至2010年9月1日 肾活检标本,共83例,对免疫组化结果进行分析.判读标 准:阳性:系膜区和毛细血管攀线状,假线状,颗粒状,团块 状的沉积0],假阳性:毛细血管腔内血浆蛋白均匀一致的着 色. 方法:标本经40g/I中性甲醛固定,石蜡包埋,连续切 片2p.m厚,分别作抗人IgG,IgM,IgA,C3c,C4c,Clq抗体 染色.观察光镜下抗体的染色结果.所有抗体均购自Do— ko公司,免疫组化染色采用Maixin.Bio公司ElIvon 主要步骤如下:石蜡切片脱蜡入水,高压 plus广谱试剂盒. 高温抗原修复,浸入30ml/I过氧化氢10min,胰酶消化l5 , 20min,滴加一抗,室温孵育2h,其余步骤按试剂盒 进行.各步骤间用0.01mol/LpH7.2PBS洗涤. 2结果 所用抗体中,IgG的假阳性率最高,C1q的假阳性率最 低(见1).在对所有标本的观察发现,免疫复合物多的 病例很少出现假阳性.出现假阳性的多是无免疫复合物沉 积的病种,如局灶节段肾小球硬化症,肾小球轻微病变等. 表183例肾活检标本免疫组化染色结果 3讨论 在肾脏疾患的病理诊断上,多种免疫复合物,多种沉积 方式决定了肾活检的免疫组化染色与常规组织的免疫组化 染色有其明显的特殊性.在技术层面上,标本的前期处理 很重要,我们一般在穿刺的24h内,完成标本固定,脱水,包 埋的环节.因为在固定液中固定的时间越长,越容易导致 抗原的丢失.过氧化氢阻断内源性过氧化物酶,胰酶的消 化暴露抗原等都很重要,而且是不可缺少的一步L23].每次 做时,都设有阳性对照.尤其对胰酶放置的时间越长,效价 越低的特性,逐步延长胰酶的消化时间.为了对胰酶的稳 定性更好的控制,我们一般在37?烤箱中进行胰酶的消化 ? 短篇报道? 步骤,消除室内温差对消化效果的影响. 所有免疫标记中,IgG较容易出现假阳性,这种假阳性 包括毛细血管腔和毛细血管攀两种.IgM和IgA的假阳性 通常出现在毛细血管腔内,在毛细血管攀上很少出现假阳 性.IgG,IgM和IgA的假阳性的出现与肾小球毛细血管腔 血液中存在相应抗体有关,3种抗体假阳性的部位略有不 同,可能与抗体分子量的大小及其在毛细血管基底膜的通 透性不同有关.补体C3e,C4c,C1q较少出现假阳性,尤其 是Clq.有研究显示,Clq抗体与狼疮性肾炎的活动性相 关,敏感性为44,100,特异性为7O,9245].在 我们所有的标本中,只有5例出现假阳性,它的出现是比较 特异而且准确的.IgA肾病在我们亚洲人的发病率约3O 左右,在我们的83例标本中.有3O例诊断IgA肾病,而 且IgA的阳性率比较稳定,较少出现假阳性. 在所有的病例中,免疫组化结果比较可靠的病例,诊断 的准确性也高,如IgA肾病,膜性肾病,狼疮性肾炎等,结合 特殊染色和HE染色,一般可以明确诊断.但是对于假阳 性比较多的病例,诊断的难度比较大,往往需要电镜才能明 确诊断.综合83例染色的结果,我们需要对lgG,IgM的 抗体浓度进行调整,进一步减少假阳性的出现,提高诊断的 准确性. 参考文献: [1]郑智勇..if-活捡病理标本制作技术.见:余英豪,郑智勇主编 . 肾穿刺活捡病理诊断彩色图谱[M].福建:福建科学技术出 版社.2008:6372. [2]余英豪.肾穿刺活检工作中应用免疫组化技术应把握的基本 问题[J].中国误诊学杂志,2005.5(16):3l223124. [3]周小鸽.免疫组织化学染色的干扰因素及其处理[J].临床 与实验病理学杂志,2006.22(4):983. [4]OelznerP.DeliyskaB,FunfstuckR.eta1.Anti—C1qantibodies andantlend.thelia1cellantibodiesinsystemiclupuserythe matosus:relationshipwithdiseaseantivityandrenalinvolv— ment[J].ClinRheumatol,2003.22(3)27l278. E5]TrouwLA.GroeneveldTw.SeelenMA.eta1.Anti—C1qall toantibodiesdepositinglomerulibutareonlypathogenicin combinationwithglomerularClqcontainingimmunecomple— xes~J].JClinInvest.2004,114(5):679—688. [6]张馨,黎磊石,孙骅,等.不同类型lgA.if-病的流行病学及临 床特点分析[J].肾脏病与透析肾移植杂志,2006,l5(4):305— 309. (收稿日期2O1O—O8—19)